实时荧光定量 PCR 仪(qPCR 仪)的使用需严格遵循操作流程,以确保实验结果的准确性和重复性。实验前准备试剂与样本准备:根据实验需求配制qPCR反应体系(通常包括模板DNA/RNA逆转录产物、引物、探针/荧光染料、qPCRMix酶、无菌水等),需在冰上操作,避免酶失活。模板:确保核酸提取纯度(OD260/280在1.8-2.0之间),避免蛋白、盐类等杂质污染。引物/探针:需验证特异性,避免引物二聚体或非特异性结合。仪器与耗材检查:检查qPCR仪电源、触摸屏/软件是否正常启动,清洁样品槽(去除灰尘或液滴,避免影响温度传导)。准备无菌的PCR管或96孔板(建议使用光学级耗材,确保荧光信号穿透性)、移液器(校准合格)、滤芯吸头(防止交叉污染)。RePure-A的智能故障检测和报警系统,能够及时提醒用户在实验过程中可能出现的问题,确保实验过程顺利进行。无锡定性基因扩增仪PCR仪
PCR 仪的**组成与功能:1. 温控系统关键部件:加热模块(如半导体加热片、热板)、温度传感器(热电偶或红外传感器)。技术要求:温度范围:通常为 4-100℃,覆盖 PCR 各阶段需求。控温精度:±0.1-0.5℃,确保引物特异性结合和酶活性稳定。升降温速率:常见为 3-8℃/s,高速 PCR 仪可达 10℃/s 以上,缩短反应时间。2. 反应模块样本容量:常见规格:96 孔板(单孔 20-100μL)、384 孔板(低通量)、单管 / 8 联管(适合少量样本)。特殊设计:梯度 PCR 仪可在同一反应中设置不同孔位的退火温度,用于优化引物条件。3. 控制系统与软件功能:预设 PCR 程序(如 touchdown PCR、巢式 PCR)、实时监控温度曲线、存储实验数据。界面:触摸屏或电脑端操作,支持程序编辑和个性化设置。南京荧光基因扩增仪PCR仪厂家直销RePure-(D)B双槽PCR操作简便,具有易读的液晶显示屏和直观的操作界面,方便用户进行实验操作。
放入 PCR 仪:将配置好的反应管放入基因扩增仪 PCR 仪中,按照设定的程序进行扩增反应。设置扩增程序:一般包括预变性、变性、退火、延伸和终延伸等步骤。预变性步骤通常在 94℃-95℃下进行 5-10 分钟,使 DNA 双链充分解开;变性温度一般为 94℃-95℃,时间为 30-60 秒,使模板 DNA 双链解链;退火温度根据引物的 Tm 值确定,一般在 50℃-65℃之间,时间为 30-60 秒,使引物与模板 DNA 特异性结合;延伸温度通常为 72℃,时间根据扩增片段长度而定,一般为 1-2 分钟 /kb;终延伸步骤在 72℃下进行 5-10 分钟,确保所有扩增产物延伸完整。循环次数一般为 30-40 次。
定性基因扩增仪(PCR 仪)是分子生物学领域用于实现聚合酶链式反应(PCR)的设备,其通过精确控制温度循环,使 DN段在体外实现指数级扩增,为基因检测、疾病诊断、科研等提供关键技术支持。PCR的原理是利用DNA的热变性、复性及延伸特性,通过循环控温实现DNA扩增,具体过程如下:变性阶段:将反应体系加热至94-96℃,使双链DNA解旋为单链。退火阶段:降温至50-65℃,让引物与单链DNA的特定区域互补结合。延伸阶段:升温至72℃左右,DNA聚合酶以引物为起点,沿模板链合成新的DNA链。循环重复:上述三步为一个循环,通常进行25-40次,使目标DNA片段以2ⁿ的倍数扩增(n为循环数)。Q9604充分考虑了用户的需求,直观的操作界面和简便的程序设置,降低了实验的复杂性,提高了数据的可靠性。
1. **参数温度均匀性:各孔位温度差异≤0.5℃,避免扩增效率不一致。热循环重复性:多次运行同一程序时,温度曲线重合度高,保证实验可重复性。兼容性:支持不同规格反应管(如 0.2mL 管、96 孔板)和试剂体系(如 Taq 酶、高保真酶)。2. 选型建议科研场景:梯度 PCR 仪 + 低通量模块,便于优化反应条件。临床检测:高通量普通 PCR 仪或 qPCR 仪,兼顾效率和定量需求。野外或现场检测:便携式 PCR 仪(如基于微流控芯片,电池供电),适合应急检测(如**防控)。柏恒RePure系列PCR仪在扩增效果上表现出色,能够准确、可靠地扩增目标DNA序列。南京32孔基因扩增仪PCR仪厂家供应
RePure-A的光学系统经过精心设计,具备高灵敏度与高特异性。无锡定性基因扩增仪PCR仪
医疗与临床诊断:疾病检测的 “金标准”1. 病原体快速检测场景:病毒性疾病:(扩增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 检测)、HPV 分型(L1 基因扩增);细菌性疾病:结核分枝杆菌(IS6110 基因检测)、淋球菌(隐蔽质粒基因扩增)。技术价值:相比传统培养法,PCR 可缩短检测时间(如结核检测从 2-4 周缩短至 4 小时),且适用于微量样本(如脑脊液、拭子)。设备需求:高通量 96 孔板 PCR 仪,部分场景需搭配核酸提取仪实现自动化检测。2. 遗传疾病筛查场景:产前诊断(如唐氏综合征 21 号染色体三体检测)、新生儿遗传病(囊性纤维化基因 F508del 突变检测)。技术价值:通过扩增目标突变位点,结合测序或酶切分析,实现疾病的早期确诊(如脊髓性肌萎缩症 SMN1 基因缺失检测)。无锡定性基因扩增仪PCR仪