实时荧光定量 PCR 仪(qPCR 仪)凭借其能够在 PCR 扩增过程中实时监测荧光信号变化,从而实现对目的基因精细定量的特点,在多个领域都有较广且重要的应用。qPCR的高灵敏度使其能对微量生物样本(如血液、毛发、唾液、精斑等)进行检测,在个体识别、亲子鉴定等方面发挥重要作用。个体识别:通过扩增样本中特异性的短串联重复序列(STR)并定量分析,与已知样本比对,实现个体的精细识别,广泛应用于刑事案件侦破和灾难事故中的身份确认。亲子鉴定:基于亲代与子代基因序列的遗传规律,通过定量分析特定基因标记的匹配程度,确定亲子关系,结果准确性可达99.99%以上。柏恒RePure系列PCR仪进行PCR扩增,能够获得高质量的扩增产物,确保实验结果的可靠性和准确性。无锡定性基因扩增仪PCR仪型号
96 孔 PCR 仪是一种基于聚合酶链式反应(PCR)技术的仪器,通过 96 孔反应板实现一次性处理 96 个样本的基因扩增,适用于高通量检测场景。其设计**是通过精确控温(加热、冷却、恒温)实现 DNA 的变性、退火、延伸循环,广泛应用于科研、临床、农业、司法等领域。临床与医学检测大规模病原体筛查应用:、流感病毒、HPV 等传染病的批量检测(如医院检验科、疾控中心)。案例:**期间,96 孔 PCR 仪配合自动化移液工作站,单日可完成数千份样本的核酸提取与扩增。遗传疾病批量诊断应用:同时检测多个样本的致病基因突变(如地中海贫血、脊髓性肌萎缩症)。江苏定性基因扩增仪PCR仪市场报价柏恒RePure系列PCR仪具有优越的扩增效果,可靠地放大目标DNA序列,保证实验结果的准确性和可重复性。
反应体系配制与加样体系配制:按比例在离心管中混合各组分(先加非模板试剂,***加模板,避免污染),轻轻混匀(勿剧烈震荡),短暂离心(1000-2000 rpm,10-20 秒)使液体沉底。示例(20μL 体系):qPCR Mix 10μL + 上游引物(10μM)0.8μL + 下游引物(10μM)0.8μL + 模板 2μL + 无菌水 6.4μL(探针法需额外加探针)。加样:将配制好的体系逐一加入 96 孔板的对应孔中,避免产生气泡(若有气泡,用吸头刺破)。加样后用封板膜密封(确保无褶皱、无漏液),短暂离心(500-1000 rpm,30 秒),使液体聚集在孔底,避免挂壁。
样本采集:根据检测对象不同,采集具有代表性的样本。对于农作物,需从不同部位如叶片、种子等采集适量样品;对于加工食品,要考虑其成分复杂性,尽可能从多个部位或不同包装中取样,确保样本能多方面反映被检物的情况。样本粉碎:采集后的样本若为固体,需进行粉碎处理,以便后续提取核酸。可使用研磨仪、粉碎机等设备将样本粉碎成均匀的粉末状,增加核酸提取的效率和均匀性。核酸提取:利用核酸提取试剂盒或相关提取方法,从粉碎的样本中提取 DNA 或 RNA。常见的方法有 CTAB 法、SDS 法等,提取过程需严格按照操作说明进行,以保证提取的核酸纯度和完整性。核酸定量与质量检测:采用核酸定量仪,如分光光度计、荧光定量仪等,对提取的核酸进行定量分析,确定其浓度和纯度。同时,通过琼脂糖凝胶电泳检测核酸的完整性,确保核酸无降解,满足后续 PCR 检测要求。紧凑的设计和低噪音运行,让设备能够轻松嵌入各种实验室环境,而不干扰其他实验的进行。
**技术参数:决定实验精度与可靠性:1. 温控性能控温范围:需覆盖 4-100℃,满足变性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求。控温精度:±0.1-0.5℃为优,精度不足可能导致引物非特异性结合或酶活性降低(如退火温度波动易引发假阳性)。温度均匀性:各孔位温差≤0.5℃,若均匀性差,同批次样本扩增效率可能不一致,影响结果重复性。升降温速率:常规 PCR 仪速率为 3-8℃/s,高速机型可达 10℃/s 以上,可缩短单循环时间(如 30 个循环从 2 小时压缩至 1 小时)。2. 反应模块兼容性样本通量:低通量:单管、8 联管(适合少量样本,如科研初筛、临床单样本检测);中高通量:96 孔板(常规批量检测)、384 孔板(超高通量,如基因芯片预处理)。梯度功能:梯度 PCR 仪可在同一模块设置 3-5℃的温度梯度(如 55-60℃),用于优化引物退火温度,减少预实验次数。RePure-(D)B梯度功能的应用可有效减少实验中的试错次数,节省实验时间。无锡单槽基因扩增仪PCR仪电话
RePure系列PCR仪采用了梯度温控技术,能够在实验中准确调节温度梯度,可以轻松地优化PCR反应条件。无锡定性基因扩增仪PCR仪型号
仪器操作设置放置样品板:将密封好的 96 孔板平稳放入 qPCR 仪的样品槽,确保孔位对齐,盖紧仪器舱门。程序设置(通过仪器软件):预变性:通常 95℃,30 秒 - 5 分钟(热启动酶,使模板完全变性)。循环阶段(变性→退火→延伸,同时采集荧光):变性:95℃,5-15 秒(使 DNA 解链)。退火 / 延伸:根据引物 Tm 值设置温度(一般 55-65℃),20-30 秒(引物结合并延伸,荧光染料 / 探针在此阶段发光)。循环次数:通常 35-40 次(根据模板浓度调整)。溶解曲线(可选):用于验证扩增产物特异性,程序为 95℃ 15 秒→60℃ 1 分钟→缓慢升温至 95℃,同时连续采集荧光(观察是否有单一峰,排除非特异性扩增或引物二聚体)。荧光通道选择:根据使用的荧光染料 / 探针类型选择(如 SYBR GreenⅠ 对应 FAM 通道,TaqMan 探针根据标记荧光选择)。样本信息录入:在软件中标记样品类型(如标准品、未知样本、阴性对照、空白对照)及孔位对应关系。无锡定性基因扩增仪PCR仪型号