营养肉汤(NB):基础而重要的细菌培养基营养肉汤(Nutrient Broth,简称NB)是一种广使用的细菌培养基,适用于一般细菌的培养、传代、转种、复壮和增菌。其主要成分包括蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化钠。其中,蛋白胨和牛肉浸粉为微生物生长提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠则用于维持培养基的渗透压。制备方法营养肉汤的典型配方为:蛋白胨10.0g、牛肉浸粉3.0g、氯化钠5.0g,加蒸馏水至1000ml。制备时,将上述成分加热搅拌溶解于蒸馏水中,调节pH至7.2±0.2,分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。灭菌后的营养肉汤应为淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。应用领域营养肉汤适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。它广用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测,以及其他需要一般细菌培养的实验中。此外,营养肉汤还可作为一些特殊培养基的基本成分,在基础培养基中添加所需营养物质,以满足特定微生物的生长需求。注意事项在制备过程中,应穿戴实验服、护目镜、手套等防护设备,以防止培养基飞溅到皮肤或眼睛中。确保实验环境清洁,以减少微生物污染的可能性。植物组织培养的培养皿中,幼苗从愈伤组织里钻出,嫩绿色的芽尖顶着透明的盖子。DNA酶试验琼脂平板
样芽胞杆菌显色培养基:高效检测食品中的致病菌蜡样芽胞杆菌显色培养基是一种用于快速检测食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽胞杆菌的微生物培养基。这种培养基通过特异性的显色反应,使蜡样芽胞杆菌在培养基上形成蓝绿色的菌落,并且菌落周围有一圈不透明环。这种显色特性使得蜡样芽胞杆菌能够与其他非目标菌(如枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌等)区分开来。制备时,称取基础培养基7.95g,加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取0.6g蜡样芽胞杆菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动5-10分钟,使其乳化均匀。将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷却至45-50℃左右时,把蜡样芽胞杆菌添加剂加入基础培养基中,轻轻混匀,倾入无菌平皿。操作步骤按GB标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液。样品液在30±1℃增菌培养18-24小时。取增菌液划线接种于蜡样芽胞杆菌显色培养基平板上,36±1℃培养18-24小时。蜡样芽胞杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落周围有一不透明环。若24小时没有出现典型菌落,可延长培养至48小时。对可疑蜡样芽胞杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃培养18-24小时,挑取单菌落做蜡样芽胞杆菌全套生化试验。沙氏葡萄糖琼脂培养基预装培养皿这一特征使得单增李斯特氏菌能够与其他微生物区分开来,提高了检测的特异性和准确性。
无菌脱纤维绵羊全血:科研与临床应用的理想选择无菌脱纤维绵羊全血是一种经过特殊处理的全血样本,广泛应用于微生物学研究、细胞培养、免疫学研究以及临床检测等领域。其制备过程和特性使其成为生物医学研究中的重要材料。制备方法无菌脱纤维绵羊全血的制备过程主要包括以下几个步骤:无菌采集:从健康绵羊的颈静脉采集全血,确保整个过程在无菌条件下进行。纤维去除:将采集的全血置于盛有玻璃珠的三角瓶内,通过摇床不断摇动,使血纤维分离。无菌处理:在无菌条件下对脱纤维的全血进行进一步处理,确保样本的无菌状态。特性无菌性:无菌处理确保全血中不含有任何细菌、菌、支原体、衣原体等微生物,从而保证实验的可重复性和准确性。脱纤维:去除纤维成分后,全血样本更加纯净,减少了杂质对实验结果的干扰。新鲜性:采集的绵羊血为天然新鲜血液,颜色鲜红,富含各种生物活性成分。应用无菌脱纤维绵羊全血在生物医学研究中具有广泛的应用价值,包括:细胞培养:为细胞生长提供必要的营养和条件,广泛应用于细胞培养实验。免疫学研究:模拟体内的免疫反应,研究不同免疫细胞的相互作用和炎症反应。
标准Ⅱ号营养琼脂:多功能微生物培养基标准Ⅱ号营养琼脂是一种广泛应用于微生物学研究和检测的培养基,适用于多种细菌的培养、分离和计数。配方与制备标准Ⅱ号营养琼脂的典型配方为:蛋白胨:15g/L酵母提取物:3g/LD-葡萄糖:1g/L氯化钠:6g/L琼脂粉:15g/L制备方法如下:称取40g培养基干粉,加入1L去离子水中。加热煮沸至完全溶解。121℃高压灭菌15分钟。冷却至55℃以下后,倒入无菌平皿,每个90mm培养皿中倒入15-20mL培养基。应用领域标准Ⅱ号营养琼脂适用于多种细菌的培养,包括但不限于:计数与分离:用于细菌总数的测定和分离。增菌:为细菌提供丰富的营养,促进其生长。特殊培养基的制备:可作为基础培养基,添加血液、腹水或血清后用于培养链球菌、肺炎球菌等苛养菌。无菌检测:推荐用于好氧菌的无菌检测。注意事项称量与溶解:称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道不适。溶解时建议水温在40℃以下,避免琼脂结块。灭菌:灭菌后需充分摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。保存:干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。制备好的培养基应在20-30℃的环境中储存。使用:已凝固的培养基不可反复多次加热溶化使用。在制备过程中,大肠菌群显色培养基通常包含营养成分、显色底物和琼脂等成分。
平板计数琼脂(PCA):菌落总数测定的通用培养基平板计数琼脂(PCA)是一种广泛应用于菌落总数测定的非选择性固体培养基,适用于食品、化妆品、饮用水、奶制品等多种样品中微生物的计数。制备方法为:称取23.5g培养基干粉,加入1000ml蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15分钟。检验原理胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母浸粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂作为凝固剂。应用领域PCA培养基主要用于菌落总数的测定,广泛应用于食品、化妆品、饮用水等领域的微生物检测。使用方法稀释倒平板法:称取23.5g培养基,加入1000ml蒸馏水,加热煮沸至完全溶解,121℃高压灭菌15分钟。取样品25g或25ml,溶解于225ml无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液中,进行10倍梯度稀释。选择2-3个合适的稀释度,吸取1ml稀释液于无菌平皿中,加入45-50℃的培养基约15-25ml,混匀后冷却凝固。翻转平板,36±1℃培养48±2小时。平板涂布法:同稀释倒平板法前几步操作。将稀释液0.1ml或0.2ml涂布于已倒好的平板上,36±1℃培养48±2小时。注意事项配制好的培养基应尽快使用,避免长时间放置导致细菌繁殖。倒平板时,培养基温度应适宜,避免烫伤。
总之,弧菌显色培养基凭借其快速、准确、特异性高的特点,已成为检测弧菌的重要工具。DNA酶试验琼脂平板
大肠埃希氏菌O157显色培养基:精细检测的高效工具大肠埃希氏菌O157显色培养基是一种用于快速检测食品、病人粪便样品中大肠埃希氏菌O157:H7的微生物培养基。其关键原理是利用显色底物,在目标菌的酶解作用下释放出显色因子,使菌落呈现特定颜色。具体而言,O157:H7菌在培养基上显亮红色、淡红色或红色,菌落周围没有蓝色晕圈;而大肠杆菌和大肠菌群则显暗蓝色、蓝色或紫色,菌落周围有蓝色晕圈。这种培养基的特异性高,能够有效克服传统SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果。其配方包含特殊营养物质、混合显色剂和琼脂等成分。使用时,将培养基粉末溶解于蒸馏水或去离子水中,加热煮沸后冷却至45-50℃,加入CT添加剂混匀,倾入无菌平皿。在操作步骤上,先按标准方法制备样品液,取适量样品液加入mEC肉汤或mTSB肉汤中增菌培养18-24小时,再取增菌液划线接种到显色培养基上,36℃培养18-24小时。通过观察菌落颜色,可快速筛选出O157:H7菌。大肠埃希氏菌O157显色培养基广泛应用于食品安全检测、疾病预防等领域。它能快速、准确地检测出O157:H7菌,为保障公共卫生和食品安全提供了有力支持。DNA酶试验琼脂平板