斑马鱼基因敲除品系制备服务简介1.基因敲除(GeneKnockout)根据给定GeneID或Genename，分析基因保守结构域，在保守结构域或客户指定区域设计靶点并制备靶点gRNA，gRNA和Cas9共注射使基因产生移码突变，通过PCR筛选得到稳定遗传品系。2.基因敲除技术特点2.1通过将基因敲除斑马鱼品系与野生型相比较，研究者可以揭示特定基因的功能。2.2在基因组水平上将目标基因敲除，遗传背景干净清晰，是研究基因功能的金标准。服务流程▲根据客户提供的GeneID或Genename进行基因分析——▲cas9mRNA和多个gRNA靶点的设计及合成——▲高效gRNA靶点的筛选及效率验证——▲F0代斑马鱼的可遗传性筛选——▲杂合子F1代斑马鱼的基因型鉴定环特生物优势成熟的基因敲除技术快速获得稳定品系；多靶点共注射F0代验证基因功能。斑马鱼在药理学毒理学的应用。化妆品斑马鱼实验室
关于雌性斑马鱼而言，产卵量是点评其繁殖力的常用生物目标，它与鱼类繁殖过程中的多个环节（卵子发育、雌雄交配行为、性元素刺激等）相关，并对环境化学物质具有高敏感性，能直接反应鱼类繁殖力变化。环境化学物质除了直接对亲代斑马鱼的生殖系统形成损害，还可能对其子代的正常生长发育。卵黄蛋白原在斑马鱼雌鱼老练过程中发挥重要作用，老练雌鱼在体内17β-雌二醇的刺激下，由肝脏组成的VTG经过血液抵达卵巢并加工成卵黄蛋白，促进性腺发育。幼鱼和雄鱼在正常情况下不组成VTG,但在遭到雌元素和类雌元素刺激时能组成VTG，导致鱼体内VTG浓度升高，呈现雌性体征。化妆品斑马鱼实验室为什么用斑马鱼做试验？
人们发现，斑马鱼的优点十分，比如斑马鱼与人类基因十分相似，其信号传导通路与人类基本近似，生物结构和生理功能与哺乳动物高度相似，具有个体小、发育周期短、实验周期短、费用低、体外受精、透明、单次产卵数较高以及实验用药量小等优点，斑马鱼作为模式动物受到运用。之后的历史上，科学家们用模式生物斑马鱼开展了许多实验。1995年诺贝尔生理学或医学奖得主ChristianeNusslein-Volhard致力于识别和分类对决定身体计划和身体片段形成至关重要的少量基因，将目光转向鱼类，以此发现的突变。斑马鱼在基因转录调控作用实验、视网膜实验、心脏再生实验上发挥着关键作用，目前已建立高尿酸血症、、抑制血管生成、发育毒性、睡眠行为等多种模型，并已应用于多种药物筛选评价。
利用斑马鱼模型点评皮肤肌肉毒性，【点评原理】斑马鱼皮肤结构与功能与人类是高度类似的，斑马鱼皮肤含有基底层、棘层、颗粒层、透明层和表皮角质细胞层；另外还有与人皮肤结构相同的固有层、半桥粒、黑色素细胞、血管和皮下脂肪细胞等。斑马鱼皮肤间质结缔组织、胶原及其接近的纤维母细胞及皮肤基因表达亦与人类皮肤类似。我们点评斑马鱼皮肤肌肉毒性是有4个目标：1.皮肤影响；2.肌肉纹路；3.皮肤凋亡细胞定量；4.皮肤色素的变化。斑马鱼试验都需求哪些设备？
当各种内源性和外源性DNA损害因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中，而核DNA因为分子量太大只能留在原位。在中性条件下，DNA可进入凝胶发生搬迁，而在碱性电解质的作用下，DNA发生解螺旋，损害的DNA断链及片段被释放出来。因为这些DNA的分子量小且碱变性为单链，所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极搬迁构成“彗星”状图像，而未受损害的DNA部分保持球形。DNA受损越严重，发生的断链和断片越多，长度也越小，在相同的电泳条件下搬迁的DNA量就愈多，搬迁的距离就愈长。通过测定DNA搬迁部分的光密度或搬迁长度就可以测定单个细胞DNA损害程度，然后确认受试物的作用剂量与DNA损害效应的联系。彗星试验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性，研究的细胞不需处于有丝分裂期。一起，这种技术只需要少数细胞。你不知道的水中小白鼠：斑马鱼，正在默默为科学试验奉献！化妆品斑马鱼实验室
斑马鱼与人类基因类似度达87%，能再生的小鱼！化妆品斑马鱼实验室
【点评原理】关节软骨遭到急性外伤和慢性磨损，出现不同程度的损害，导致关节疼、活动受限，乃至功能丧失。关节软骨的修正首要靠软骨细胞的增殖分化，生产满足的细胞外基质修正软骨缺损。人软骨细胞通常是停止的，血管化程度低，营养首要来源于关节液和软骨下骨，修正再生则显得十分有限，需求外源性的手法来辅佐修正。DXMS破坏软骨细胞的代谢平衡，引起软骨细胞的逝世或凋亡，从而引起软骨损害。斑马鱼的骨骼发育与其他脊椎动物骨骼发育进程极其类似，因此，可用于软骨修正功效点评。斑马鱼的软骨首要散布于头部，包括七对咽颅软骨弓（下颌弓、舌弓及五对鳃弓）和脑颅软骨。根据转基因软骨荧光斑马鱼特性，患有软骨损害的斑马鱼的软骨荧光强度会显着比正常斑马鱼的软骨荧光强度要暗许多，能够显着被观察到。化妆品斑马鱼实验室
