准备试剂:准备 PCR 反应所需的各种试剂,包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、缓冲液、引物、Mg²⁺等。引物是决定 PCR 特异性的关键因素,需根据待检测的转基因成分的特定基因序列设计合成特异性引物。配置反应液:按照一定的比例和顺序,将各种试剂加入到无菌的 PCR 管中,配置成 PCR 反应体系。一般反应体系包括 10×PCR 缓冲液、2.5mmol/L dNTPs、25mmol/L MgCl₂、10μmol/L 引物、5U/μL Taq DNA 聚合酶以及适量的模板 DNA,总体积通常为 20μL 或 50μL。柏恒RePure系列PCR仪进行PCR扩增可以获得高度特异性和稳定性的扩增产物。无锡荧光基因扩增仪PCR仪
性能指标温度控制准确性:指样品孔温度与设定温度的一致性,直接关系到实验的成败,一般要求温度准确性在±0.1℃-±0.2℃之间。均匀性:指样品孔间的温度差异,关系到不同样品孔进行反应结果的一致性,良好的温度均匀性可使实验结果更具重复性,通常温度均匀性应在±0.2℃-±0.5℃范围内。升降温速度:更快的升降温速度可以缩短反应时间,提高实验效率,同时减少非特异性结合的机会,一般PCR仪的升降温速率在3℃/s-6℃/s左右。模块规格:常见的有96孔、48孔、32孔等,可根据实验需求选择合适的模块规格。此外,一些PCR仪还兼容0.2ml、0.5ml管以及96标准微孔板等不同类型的反应容器。程序设置:包括可记忆程序数目、比较大程序段数、比较大温阶步数、比较大循环次数、比较大保温时间等。丰富的程序设置功能可以满足不同实验的需求。南京基因扩增仪PCR仪有哪些灵活的温度设置,使得RePure-A特别适合于复杂样本的检测与多重靶标的扩增。
PCR 仪的维护与注意事项:日常维护:定期清洁反应模块,去除残留试剂(如矿物油、PCR 产物),避免污染。校准温度:使用标准温度计验证控温精度,每年至少 1 次。操作注意:配置反应体系时需在冰上进行,防止引物或酶提前活化。避免频繁开关仪器,减少温控模块损耗。实验后及时进行模块消毒(如用 75% 乙醇擦拭),防止交叉污染。PCR 仪的发展趋势:便携化与集成化:微流控芯片 PCR 仪将反应体系微型化,可实现 “样本进 - 结果出” 的即时检测(如 POCT 设备)。高通量与自动化:结合机器人工作站,实现从样本提取到 PCR 扩增的全流程自动化,适用于大规模筛查。多功能整合:如与测序仪联用,实现 “扩增 - 测序” 一体化,缩短基因分析周期。
筛选转基因作物:在食品生产中,许多原料来自转基因作物。PCR 仪可对食品中的植物成分进行检测,通过扩增特定的转基因元件,如启动子、终止子、目的基因等,判断食品是否含有转基因成分。例如,检测转基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,确定大豆制品是否为转基因产品,为消费者提供知情权和选择权。监控转基因食品标识:PCR 技术能够准确检测食品中的微量转基因成分,有助于监管部门对市场上的食品进行严格监控,确保转基因食品按照相关法规进行正确标识,防止误导消费者。RePure-(D)B利用梯度功能进行温度梯度设计,能够快速找到适合的反应温度,提高PCR反应效率。
科研实验室:优先选择带梯度功能的机型(如 Veriti、C1000),便于优化引物退火温度。临床检测:选择兼容荧光定量模块的机型(如 QuantStudio),实现定性 + 定量一体化检测。工业级批量检测:选择快速升降温机型(如某些国产型号升降温速率≥6℃/ 秒),缩短检测周期。日常维护定期清洁热盖与反应槽,避免污染或液体残留影响温度传导。使用** PCR 板 / 管,确保与仪器模块紧密贴合(非适配耗材可能导致孔间温度不均)。实验优化高通量检测时,建议使用热启动酶和定量加样设备(如多通道移液器),减少非特异性扩增和加样误差。长时间运行后,定期用标准品验证扩增效率(如使用已知浓度的 DNA 模板检测 Ct 值重复性)。RePure-T非常适合需要调节多个样本和多个温度设置的研究,例如基因扩增、变异检测和生物标志物发现等领域。荧光基因扩增仪PCR仪品牌
柏恒RePure系列PCR仪进行PCR扩增,能够获得高质量的扩增产物,确保实验结果的可靠性和准确性。无锡荧光基因扩增仪PCR仪
司法与法医鉴定DNA 数据库构建应用:同时扩增 96 份血样的 STR 位点(如 CODIS 系统中的 13 个**位点),加速犯罪现场样本比对。亲子鉴定批量处理应用:法医实验室通过 96 孔板同步处理多个家庭的样本,缩短鉴定周期。5. 食品与环境安全食品微生物高通量检测应用:同时检测多批次食品中的致病菌(如沙门氏菌、李斯特菌)或过敏原基因(如花生过敏原)。环境微生物群落分析应用:扩增土壤 / 水样中的微生物 16S rRNA 基因,批量构建微生物多样性文库。无锡荧光基因扩增仪PCR仪