常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。培养基制备器负载的压力，有效地避免了培养基过温失效和培养基中气泡的产生!中国香港培养基制备器供应商
培养基质量测试：（1）澄清度：水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取，细胞才能生长增殖，因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查，判断细胞培养基的澄清度。按中国药典2005年版二部附录ⅨB进行。（2）pH值：哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度，pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品，用注射用水（水温20℃-30℃）溶解至1L，加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中，用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行；加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中，按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行。江苏培养基制备器哪家好真空抽滤不畅应清洁滤膜及检查气密性。
培养基的称量和溶解：小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。注意：培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。
配制培养基的原则：调节氧化还原电位(Eh)各种微生物对培养基的Eh要求不同。适宜好氧微生物生长的Eh值一般为+0.3~+0.4V，厌氧微生物只能在+0.1V以下生长，因此，培养好氧微生物必须保证氧的供应，可在培养基中加入氧化剂提高Eh值。调节渗透压多数微生物能耐受较大范围渗透压的变化。培养基中营养物质的浓度过大，会使渗透压过高，使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂，因此，配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加人适量的Nacl以提高渗透压。原料来源的选择力求节约：配制培养基还应遵循力求节约的原则，尽量选用价格便宜、来源方便的原料。特别是在工业发酵中，培养基用量大，更应注意利用低成本的原料，降低产品成本。快速冷却技术避免热敏感成分降解，保护活性物质。 设备兼容不同规格容器，满足小试到中试生产需求。
Systec培养基准备器可以快速的准备好灭菌，放入灭菌锅，“水套系统”里加入夹层水（灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导），加入培养基原料，准备启动灭菌程序。培养基可以直接在Sampleprep内悬浮溶解。强力磁力搅拌确保培养基在内腔里混合的均匀性，并防止凝结。培养基可以在灭菌前用WATERBATH（水浴）模式预先溶解。同时，直观的图形化界面使没有经过专门培训的人员也能方便的操作。用户可以自定义设置多达50个灭菌程序，比如灭菌温度、时间、分装温度等。它们可以被储存起来并随时调用。培养基制备器解冻血清时,请按照的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)!广东全自动培养基制备器
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培养基配置原则：营养物质浓度及配比合适，培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不但不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑菌或杀菌作用。另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C/N）的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中，培养基碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；当培养基碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。再如，在发酵生产过程中，可以通过控制培养基中有效氮（或碳）源与迟效氮（或碳）源之间的比例来控制菌体生长与的合成协调。中国香港培养基制备器供应商
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