胎牛血清参与细胞培养实验为细胞生长提供必要的营养成分，对于研究细胞的科学人士来说，血清都不会陌生，其中胎牛血清是实验操作的常客。一般而言，胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后，发育未完全的胎牛心脏穿刺后，通过一系列工艺处理获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子，一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。胎牛血清的灭活，一般是用水浴加热的方式...

  膜片钳技术在通道研究中的重要作用：1.与药物作用有关的心肌离子通道：心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。近年来，国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展，使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。2.对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究：通过对各种生理或病理情况下细胞膜某种...

  在体光纤成像记录技术的问世，为解决这一困难提供了广阔的空间，将使药物在临床前研究中通过利用在体光纤成像记录的方法，获得更具体的分子或基因述水平的数据，这是用传统的方法无法了解的领域，所以在体光纤成像记录将对新药研究的模式带来**性变革。其次，在转基因动物、动物基因打靶或制药研究过程中，在体光纤成像记录能对动物的性状进行查看检测，对表型进行...

  在体光纤成像记录和传统的体外成像或细胞培养相比有着明显优点。首先，在体光纤成像记录能够反映细胞或基因表达的空间和时间分布，从而了解活的物体动物体内的相关生物学过程、特异性基因功能和相互作用。由于可以对同一个研究个体进行长时间反复查看成像，既可以进步数据的可比性，避免个体差异对试验结果的可影响，又不需要杀死模式动物，节省了大笔科研用度。第三...

  全细胞膜片钳模式下有电压钳记录和电流钳记录两种。电压钳记录的原理与电压钳技术相似，但有所不同：首先，全细胞电压钳记录只使用单根电极，但在电学效果上同时实现了电压钳制和电流记录。其次，电压钳记录的电极不细胞，对细胞造成的损伤较小，因而能用于小细胞如神经元的研究。电流钳记录则是通过钳制电极电流来测量膜电位。电流钳在本质上也是电压钳位，它将差分...

  一种提高膜片钳实验效率的方法与流程：膜片钳技术是一种记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上离子通道分子活动的技术。是用来研究单个离体的活细胞、组织切片或细胞膜片离子流的电生理实验技术。这项技术在可兴奋细胞如神经元、心肌细胞、肌纤维和胰腺细胞的研究中起至关重要的作用，也可用于研究特殊制备的巨型球状体中的细菌离子通道。传统膜片钳技术对实验人...

  膜片钳记录的几种形式：全细胞记录构型(whole-cell recording)　高阻封接形成后，继续以负压抽吸使电极管内细胞膜破裂，电极胞内液直接相通，而与浴槽液绝缘，这种形式称为“全细胞”记录。它既可记录膜电位又可记录膜电流。其中膜电位可在电流钳情况下记录，或将玻管连到标准高阻微电极放大器上记录。在电压钳条件下记录到的大细胞全细胞电流...

  聚合酶链式反应又称多聚酶链式反应，是一项利用DNA双链复制的原理，在生物体外复制特定DN段的核酸合成技术。透过这项技术，可在短时间内大量扩增目的基因，而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。聚合酶链反应是是一种简单，廉价和可靠的方法复制DN段，这个概念适用于现物学和相关科学的许多领域。 PCR可能是分子生物学中使用很较广的技术。这种技术被用于...

  小动物在体光纤成像记录图像处理软件除了提供含有光子强度标尺的成像图片外，还能计算分析发光面积、总光子数、光子强度的相关参数供实验者参考。原则上，如预实验时拍摄出图片非特异性杂点多，需降低曝光时间；反之，如信号过弱可适当延长曝光时间。但曝光时间的延长，不单增加了目的信号，对于背景噪音也存在一个放大效应。同一批实验应保持一致的曝光时间，同时还...

  聚合酶链式反应准备：PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，纯度必须较高，第二浓度不能太高以免抑制。缓冲液的成分很为复杂，除水外一般包括四个有效成分：缓...

  膜片钳技术基本原理与特点：膜片钳技术本质上也属于电压钳范畴，两者的区别关键在于：①膜电位固定的方法不同；②电位固定的细胞膜面积不同，进而所研究的离子通道数目不同。电压钳技术主要是通过保持细胞跨膜电位不变，并迅速控制其数值，以观察在不同膜电位条件下膜电流情况。因此只能用来研究整个细胞膜或一大块细胞膜上所有离子通道活动。目前电压钳主要用于巨大...

  如何避免血清中产生沉淀？按如下操作可避免沉淀的产生：解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。血清分装冻存时，须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也...