膜片钳只适用于药物的初筛和二次筛选,且对样本有很高的选择性,而传统的膜片钳技术可适用于各种样本,应用范围广,能够分析检测所有的离子通道类型,同时能够分析离子通道的动力学特征。因此目前,传统膜片钳技术仍然是不可替代的。在进行膜片钳实验时,玻璃电极给负压并吸住细胞,形成高阻封接,破膜,给药,记录数据的过程,都需要细胞保持比较好的活性状态,才能...
查看详细 >>在体光纤成像记录应用:1、在体光纤成像记录通过光学记录特定细胞类型在自然状态下的神经活动;2、实时观测动物在进行复杂行为时的神经投射活动;3、阐明特殊的神经环路在动物行为中的作用;4、通过直接观测和投射相关的神经环路的动态活动模式,整机一体化,轻巧便携,集成信号采集与数字同步模块;通道数:默认采样通道数7路,可根据实验需求订制扩展;通过荧...
查看详细 >>膜片钳技术在通道研究中的重要作用:1.与药物作用有关的心肌离子通道:心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。近年来,国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。2.对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究:通过对各种生理或病理情况下细胞膜某种...
查看详细 >>聚合酶链式反应的特点:灵敏度高:PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中很小检出率为3个细菌。简便、快速:PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将...
查看详细 >>由于光学相干断层扫描采用了波长很短的光波作为探测手段,在体光纤成像记录它可以达到很高的分辨率。首先将一束光波照在组织上,一小部分光被样品表面反射,然后被收集起来。大部分的光线被样品散射掉了,这些散射光失去了远视的方向信息,因此无法形成图像,只能形成耀斑。散射光形成的耀斑会引起光学散射物质(如生物组织、蜡、特定种类的塑料等等)看起来不透明或...
查看详细 >>膜片钳操作实验:膜片钳实验难度大、技术要求高,要掌握有关技术和方法虽不是很困难的事,但要从一大批的实验数据中,经过处理和分析,得出有意义、有价值的结果和结论,就显得不那么容易,有许多需要注意和考虑的问题,包括减少噪音,避免电极前端的污染,提高封接成功率,具体实验过程中还需要考虑如何选取记录模式,为记录特定离子电流如何选择电极内、外液,如何...
查看详细 >>膜片钳技术——打开细胞电生理之门:定义:膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”,是一种基于电工学和电化学原理的分析手段,可以通过检测细胞的电信号(电生理性质)来研究化学物质、电、机械力等刺激因素对细胞功能的影响,从而帮助揭示细胞在生命活动中的化学和生物学机制。原理:膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的...
查看详细 >>血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋...
查看详细 >>如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清...
查看详细 >>聚合酶链式反应准备:10×扩增缓冲液、4种dNTP混合物(终浓度)、引物(终浓度)、模板DNA、Taq DNA聚合酶、Mg2+(终浓度)、补加双蒸水等。其中dNTP、引物、模板DNA、Taq DNA聚合酶以及Mg2+的加量(或浓度)可根据实验调整,以上表格只提供大致参考值。PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即:引物(PCR引...
查看详细 >>胎牛血清与其它牛血清有何区别?根据牛出生时间和血清采集分离方法分为:胎牛血清:胎牛血清是指怀孕3-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏密闭穿刺后,通过一系列工艺处理较为终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子会自动消失。新生牛血清:出生14小时内未进食的新生牛,通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清。小牛血...
查看详细 >>聚合酶链式反应:三步:变性:模板DNA加热变性;复性,引物与它的靶序列发生退火,引物DNA量多,使引物和模板在局部形成杂交链;延伸,4种dNTP 与 Mg2+ 存在的条件下,DNA合成酶催化以引物为起始点,按5'-3'方向进行延伸。上面三步为一个循环,可使拷贝数到达2*E-6-2*E-7。PCR产物一段双链DNA,是由它的末端引物的5’端...
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