Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/µl):高效除PCR污染的关键酶在分子生物学研究中,PCR技术的应用极为广,但PCR产物的交叉污染问题一直是影响实验准确性和可靠性的关键因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作为一种高效的酶工具,凭借其独特的性能和广的应用,已成为解决这一问题的理想选择。一、产品特点高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能够特异性地催化DNA中尿嘧啶(dU)碱基与脱氧核糖之间的N-糖苷键水解,释放游离尿嘧啶。这种酶对单链和双链DNA均有效,但对RNA或长度不超过6个碱基的DNA寡核苷酸无活性。防止PCR产物污染UDG的主要应用之一是防止PCR产物的交叉污染。通过在PCR反应中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR产物,UDG可以特异性地切割这些含有dU的DNA,从而防止其在后续反应中作为模板被扩增。反应条件兼容性UDG在pH8.0左右表现出活性,且不需要二价阳离子,可在较宽的pH范围内工作。它对高离子强度(>200mM)敏感,因此在使用时需注意反应体系的离子浓度。在使用Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 时,建议根据模板类型和目标片段长度调整反应条件。Recombinant Human MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag
在分子生物学研究中,RNA的完整性分析是评估RNA质量和功能的重要环节。10×RNALoadingBuffer作为一种高效、便捷的上样缓冲液,在RNA电泳实验中发挥着不可或缺的作用。本文将详细介绍10×RNALoadingBuffer的产品特点和性能。一、产品特点高浓度设计10×RNALoadingBuffer是一种10倍浓缩的上样缓冲液,使用时需稀释至1×。这种高浓度设计减少了试剂的使用量,同时保证了样品在电泳过程中的稳定性和均匀性。示踪染料的双重指示该缓冲液含有溴酚蓝(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)两种示踪染料。溴酚蓝在1.2%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳中与约500个碱基的RNA迁移速率相当,而二甲苯青则与约5000个碱基的RNA迁移速率相当。这种双重示踪设计能够直观地反映电泳的进程,帮助实验人员准确判断RNA的迁移情况。无RNase污染RNA分子对RNase极为敏感,因此在RNA实验中,避免RNase污染是关键。10×RNALoadingBuffer经过严格的质量控制,确保无RNase杂质污染,从而保证RNA样品的完整性。适用性该缓冲液适用于多种类型的RNA样品,包括总RNA、小RNA以及特定RNA的片段的电泳分析。它不仅可用于甲醛变性的琼脂糖凝胶电泳,也适用于非变性电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。Recombinant Human MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag优化的缓冲体系以及荧光染料,能够高效扩增长达25 kb的基因组片段、14 kb的cDNA片段以及40 kb的λDNA片段。
robe qPCR Mix (2×, High ROX):高特异性与强校正能力的qPCR解决方案Probe qPCR Mix (2×, High ROX) 是一种为实时荧光定量PCR(qPCR)设计的即用型预混液,特别适用于需要高浓度ROX校正染料的qPCR仪器。该预混液结合了热启动Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及高浓度ROX,能够实现高效、特异的基因定量检测。产品特点高特异性和灵敏度:采用热启动Taq DNA聚合酶,结合抗体或化学修饰技术,有效减少非特异性扩增,提高检测灵敏度。高浓度ROX校正:含有高浓度ROX染料,适用于需要高浓度ROX作为校正染料的qPCR仪器,如ABI 7000、7900HT等。防污染系统:部分产品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能够有效降解含尿嘧啶的PCR产物,防止假阳性。快速反应:支持快速qPCR程序,可在短时间内完成检测,提高实验效率。操作简便:2×预混液设计,只需加入引物、探针和模板即可进行反应,减少了操作步骤和污染风险。应用场景基因表达分析:用于定量检测特定基因的表达水平。病原体检测:快速检测病毒、细菌等病原体的DNA。SNP分型和拷贝数变异分析:通过探针法实现高特异性的基因分型。多重qPCR:可在同一反应中同时检测多个目标基因。
一、产品特点(一)高灵敏度该qPCR Mix采用了先进的热启动Taq酶技术,通过化学修饰将酶活性锁定在低温条件下,在PCR反应的高温变性阶段释放活性。这一特性有效避免了非特异性扩增,显著提高了反应的灵敏度,即使对于低丰度的靶基因,也能实现检测。例如,在检测稀有突变基因时,其高灵敏度能够确保即使在野生型基因背景中含量极低的突变基因也能被准确识别,为病痛早期筛查等研究提供了有力支持。(二)高特异性其独特的缓冲体系经过优化,能够精确调控引物与模板的结合过程。在反应过程中,该体系可有效减少引物二聚体的形成,同时增强引物与目标模板的特异性结合能力。这使得在复杂的基因组背景下,目标基因得以高效扩增,从而显著提高了qPCR反应的特异性。在多基因家族成员的区分检测中,这种高特异性优势尤为明显,能够避免因引物错配导致的非目标基因扩增,确保实验结果的准确性。可以利用现有的计算工具,如CRISPR design tools,预测gRNA的活性和特异性,以辅助实验设计 。
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一种来源于嗜冷海洋细菌的热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。该酶能够特异性地催化水解含有尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶碱基,释放游离尿嘧啶,并在DNA中产生无碱基位点(AP位点),从而防止PCR产物的气溶胶污染。产品特点与传统UDG酶相比,热敏UDG酶在室温下即可高效发挥作用,且对温度极为敏感,可在50℃下10分钟内完全失活。这种特性使其在PCR和RT-PCR反应中表现出色,尤其适用于需要快速灭活的场景。此外,该酶对单链和双链DNA均具有活性,但对RNA或不含尿嘧啶的DNA无作用。其高纯度和低残留特性使其在高投入量下也不会对检测体系产生抑制。应用场景去除PCR产物污染:通过降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染导致的假阳性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反应中,热敏UDG酶可在逆转录前去除残留的PCR产物。单链或双链DNA处理:用于去除DNA中的尿嘧啶碱基。在使用过程中,建议将酶液存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后立即放回-20℃保存。此外,热敏UDG酶在RT-qPCR反应中表现出良好的兼容性,即使在高投入量下也不会对反应产生抑制。利用牛痘DNA拓扑异构酶I的连接原理,可以在无需DNA连接酶的情况下,快速高效地连接DNA片段,实现克隆。Hexarelin
该Master Mix不仅在长片段扩增表现出色,还具备保真性其保真性远高于普通Taq酶能够减少扩增过程中的错误率。Recombinant Human MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 则是提升PCR特异性和效率的关键试剂。这种预混液结合了热启动技术和优化的反应体系,为准确的基因扩增提供了强大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 是一种即用型的2倍浓度预混液,包含了Hot-Start Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及增强剂。其优点在于热启动技术的应用。通过在常温下抑制Taq酶活性,该预混液有效避免了非特异性扩增和引物二聚体的形成,从而提高了PCR反应的特异性和灵敏度。这种特性尤其适用于复杂模板(如高GC含量或低丰度基因)的扩增,以及对特异性要求较高的实验场景。此外,该预混液不含染料,为实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据具体需求选择后续的检测方法,例如凝胶电泳分析、DNA测序或克隆。这种无染料设计也使得预混液适用于多种下游应用,而不会对结果产生干扰。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍浓度设计进一步简化了实验操作。实验人员只需加入模板DNA和引物,即可直接进行反应,减少了手动配制反应体系的步骤和可能出现的误差。这种效率、便捷的特性使其成为分子生物学实验室的理想选择。Recombinant Human MSLN/Mesothelin Protein,hFc Tag
在分子生物学研究中,PCR技术是基因扩增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 则是实现高保真扩增的理想选择。这种预混液结合了Pfu DNA聚合酶的高保真特性和优化的反应体系,为科研人员提供了一个效率、便捷且可靠的实验平台。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一种即用型的2倍浓度预混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、优化的反应缓冲液以及必要的辅助成分。Pfu DNA聚合酶以其保真性而闻名,其3'-5'外切酶活性能够在DNA合成过程中纠正错误掺入的碱基,从而提高扩增产物的准确性。与Taq DNA聚合酶相比,Pfu...