2psi），并需要15秒的时间来灌注电池。加载，然后以27.6kPa（4psi）流动8和6组井停留15秒以捕获细胞。然后在69kPa处流动6组井韦尔斯1-5（1psi）持续30秒以冲洗装载通道这些条件可能需要根据您的细胞类型进行优化所需的捕获密度。6.评估显微镜的负载密度。如果负载不足发生了，rcpeat加载协议7.要清理去除未捕获细胞的腔室，请流过一个或多个入口孔在34.5kPa（5psil的情况下持续5分钟）的解决方案。在手动模式选项卡上：单击“运行自定义序列”按钮或转到ProtocolEditor输入所需的参数。有关创建的更多信息压力[kPa）协议请参阅CellASICONIX2微流体系统程序图6.1-5井的流速指导。8.进入“细胞培养”或“溶液切换”部分。盘子存放存放在室温下。不要存放在上海益启生物电阻仪订购方便。奉贤区Merck细胞计数器Merck仪器联系人
白的免疫检测：SNAP i.d.“ 2.0系统与SNAP 1.d.系统（首先代）与标准免疫检测一种。 SNAPi.d。 2.0蛋白质检测b。快照蛋白质检测。标准系统Midi印迹系统首先代，单孔免疫检测对照，茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液（10-0.63 ug）被转移到Immobilon9-P膜上。印迹被阻止含0.5％的非脂肪干mik（NFDM），并在加筋的盐水中制备含0. 1％Tweene 20表面活性剂（TBST），并用主要抗B-Tubulin探测（MAB3408）和次级HRP偶联的山羊蚂蚁（AP1 24P）在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。图2. erbB2的免疫检测：SNAP i.d.9 2.0系统与SNAP i.d.系统（首先代）与标准免疫检测s。 S奉贤区Merck细胞计数器Merck仪器联系人益启生物是默克细胞计数器的代理商。
你带盖框架（1）迷你吸墨纸架（2）SNAP1.d.2.0迷你吸盘固定架（双包装）SNAP2FRMN021个迷你带盖框架（2）迷你吸墨纸架（4）SNAPLd.o2.0MidiBlot固定框架（单个包装）SNAP2FRMD011个带盖Midi框架（1）Midi吸墨纸架（2）SNAPl.d.2.0Midi印迹固定框架（双包装）SNAP2FRMD021个迷笛中框（2）Midi吸墨纸架（4）SNAPl.d.2.0MultiBlot固定器（包括2个孔空白）SNAP2BHMB05050SNAPi.d.2.0迷你吸管座SNAP2BHMN0100100SNAPL.d.e2.0Midi污点持有人SNAP2BHMD0100100SNAPi.d.o2.0抗体收集盒SNAPABTR20快照印迹辊SNAP2RL印迹
阳光直射的地方。 细胞培养使用CellASICOONIX2微流体系统进行细胞培养1.从孔中吸出溶液以用于灌注（孔1-5）。向这些孔中添加350μL培养基。确保未使用溶液入口孔中充满了缓冲液。2.清空6号和8号孔，以确保在更换过程中正确交换溶液灌注。3.按照以下说明将微流体板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流体系统用户指南。4打开CellASICOONIX2软件，选择“新建”之一实验选项，然后在下拉列表中找到B04A板。单击协议编辑器选项卡，然后输入所需的步骤，然后情况。对于1-5井，建议的压力为6.9-13.8kPa（1-2psi）可提供足够的营养，并且营养含量极低压力。有关创建协议的信息，请参阅CellASICB《ONIX2微流体系统用户指南》。5.为了监测细胞生长，将采购细胞跨膜电阻仪哪家靠谱？
15分钟。图4.扩展孵化（过夜）：SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5％NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒，标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，对于HRP偶联的二抗山羊抗兔（AP132P），将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后，将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化（1小时）：，SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免上海益启生物WB实验加速器订购方便。奉贤区Merck细胞计数器Merck仪器联系人
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