Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。N-糖苷酶 F (PNGase F)在酵母中重组表达,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。Recombinant Human C5AR Protein-VLP
胶原蛋白是哺乳动物体内含量多的功能性蛋白[1]。胶原蛋白由3条α链的多肽链亚基组成,α链自身构型为左手螺旋,三条α链又互相缠绕成右手螺旋结构,即胶原蛋白的“胶原域”[2]。胶原蛋白的一级结构分析结果显示,其肽链由(Gly-X-Y)n组成,其中X通常是脯氨酸,Y通常是羟脯氨酸[3]。按照胶原蛋白发现的先后顺序,可将其分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28种胶原蛋白[4],Ⅰ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ),主要分布于骨骼中[5];Ⅱ型胶原蛋白由[α1(Ⅱ)]3组成,主要由软骨细胞产生,因其含有大量赖氨酸残基,因而糖基化率较高[6];Ⅲ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅲ)]3,因含半胱氨酸所以肽链间形成二硫键,因此其本身就可形成细纤维,Ⅲ型胶原蛋白血管中含量较高,主要存在于肺泡间质中且分布杂乱,因而形成复杂的网状结构,正是这种结构使得肺组织具有良好的柔韧性与弹性,并且可以为细胞提供充足养分,使得皮肤饱满透亮[7]。Recombinant Human C5AR Protein-VLP鼠AFGF与人AFGF具有96%的氨基酸序列身份,因此它在鼠和人AFGF之间表现出相当大的物种交叉反应性。
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)注意事项1.本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。2.不建议37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释到咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。5.本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(如DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25mMTris-HClpH8.0洗脱缓冲液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。
RecombinantBiotinylatedCynomolgusSiglec-10Protein,His-AviTag性能参数分子别名(Synonyms)SLG2;SIGLEC10;MGC126774;PRO940表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedCynomolgusSiglec-10ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminus.ItcontainsThr17-Asn552.[Accession|A0A2K5WBX8]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof61.71kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto72-82kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGE制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutionin25mMMES,150mMNaCl,0.5MArginine(pH5.0).储存条件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for1yearfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.UbcH5a/UBE2D1具有一个保守的E2催化结构域,该结构域含有一个活性位点半胱氨酸残基。
Dabigatranetexilatemesylate,又称甲磺酸达比加群酯,是可口服的凝血酶抑制剂,是一种抗凝药,通过竞争结合凝血酶的纤维蛋白特异结合位点,阻碍纤维蛋白生成,从而抑制血栓的形成。产品信息英文别名(EnglishSynonym)Dabigatranetexilatemesylate,Pradaxa,BIBR1048MS,Dabigatranetexilatemethanesulfonate中文名称(ChineseName)甲磺酸达比加群酯,达比加群酯甲磺酸盐靶点(Target)Thrombin通路(Pathway)Protease/MetabolicEnzyme--ThrombinCAS号(CASNO.)872728-81-9分子式(Formula)C35H45N7O8S分子量(MolecularWeight)723.84外观(Appearance)粉末纯度(Purity)≥98%溶解性(Solubility)溶于DMSO运输和保存方法-25~-15℃保存,有效期3年。使用方法【数据来自于公开发表的文献,供参考,具体使用浓度请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,细胞种类,培养特性等)进行摸索和优化。】动物实验(体内实验)在体内,口服dabigatranetexilate在大10-50mg/kg)和恒河猴(1-5mg/kg)时间剂量依赖性地表现出抗凝效果。通过泛素-蛋白体途径(UPP)中的酶与底物蛋白共价连接,并在26S蛋白体降解ATP依赖的细胞蛋白中发挥主要作用。Recombinant Human C5AR Protein-VLP
α-凝血酶(α-Thrombin)可以启动XIII因子和血小板,或者用作血管收缩剂。Recombinant Human C5AR Protein-VLP
糖生物学中的应用糖基化分析Endo H常用于分析蛋白质的糖基化状态。通过Endo H处理,可以将蛋白质上的高甘露糖型糖链去除,从而简化糖链结构,便于进一步分析。蛋白质功能研究Endo H可用于研究糖基化对蛋白质功能的影响。通过比较Endo H处理前后蛋白质的生物学活性,可以揭示糖基化在蛋白质功能中的作用。药物开发某些药物的疗效和药代动力学特性受其糖基化状态影响。Endo H可用于研究药物分子的糖基化修饰,为药物设计提供重要信息。疾病诊断异常的蛋白质糖基化与多种疾病相关。Endo H可用于检测疾病相关蛋白质的糖基化改变,为疾病诊断提供新的思路。结论Endo H作为一种重要的工具酶,在糖生物学研究中发挥着关键作用。深入理解Endo H的结构与功能,将有助于揭示蛋白质糖基化在生命过程中的作用,为相关疾病的诊断提供新策略。Recombinant Human C5AR Protein-VLP
核苷酸胶体染料 SYBR Green I核酸染料 10000×SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光核酸染料,广应用于qPCR、琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。其10000×浓度的储备液为实验提供了极大的便利性和灵活性。产品特点高灵敏度:SYBR Green I与双链DNA结合后荧光强度明显增强,能够检测到低至皮克级的DNA。安全性高:与传统的溴化乙锭(EB)相比,SYBR Green I的毒性较低,使用更加安全。适用范围广:适用于qPCR、等温扩增、基因芯片以及琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳。兼容性强:可在紫外或蓝光下观察,适用于多种成像系统。应用场景qPCR...