检查具备条件受检者,经历一段经常排精过程后,禁房事5-7天(上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时);[1]备大口有盖清洁干燥容器一个,以**方式获取精液,一次全部射入容器,盖上盖,记录标本离体时间;贴身保温,30分钟内送到化验室,并向检验员提供标本取出时间。精液常规观察:精液总容量(毫升),精子活动情况,精子密度(个/毫升),精液液化时间(标本取出到精液液化的时间),不动精子(个/高倍视野)等。见不动精子,须染色方可区分:不活动的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必须离心后检验,仍然找不到精子;方可报告无精。经三次取样化验,结果仍然找不到精子方可确认无精子症。精子分析系统较传统的分析法比较,具有速度快、量比性好、准确性高、为临床和科研提供客观的检测依据。北京水生动物精子分析DCL
CASA可将每个精子的活力按以下分级:(1)前向运动型(PR):精子运动活跃、线性运动或者在较大的范围内运动。(2)非前向运动型(NP):所有其他非前向运动的形式,如精子在较小的范围内运动,精子头部轻微移位或只观察到尾部摆动。(3)完全不动型(IM):精子完全不动。CASA系统检测的这些参数有一套标准的术语。(1)VCL=曲线速度(mm/s)。精子头沿其实际的曲线,即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。(2)VSL=直线速度(mm/s)。根据精子头在开始检测时的位置与***所处位置之间的直线运动的时间平均速度。(3)VAP=平均路径速度(mm/s)。精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。(4)ALH=精子头侧摆幅度(mm)。精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。以侧摆的最大值或平均数值表示。(5)LIN=直线性。曲线轨迹的直线性。即VSL/VCL。(6)WOB=摆动性。精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性。空间平均路径的直线性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打频率(Hz)。精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。(9)MAD=平均移动角度(度)。精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均***值。北京前向运动精子分析VSLCASA系统操作简便,检测速度快,且重复性优于人工检测。
CASA,即计算机辅助精子分析,是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调,相比人工检测,CASA提供更准确的数据和精子动力学参数,如前向运动和超活化运动,以及获能精子特征参数。研究显示,CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪,通常通过相差显微镜识别活动精子,适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果,操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹,更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪,通常进行两次分析,每次至少200个精子,结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时,需精确测量精子体积,确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键,每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**,可能需要稀释以减少误差。形态分析方面,CASA能够定量评估精子头部、中段和主段,尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**,可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语,如VCL(曲线速度)、VSL(直线速度)等,它们反映了精子运动的不同特性。
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。CASA系统通过计算机分析精子运动参数,能够提供精确的量化数据,优于人工检测方法。
CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态,可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常,还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数,以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。与人工操作相比,自动化系统更具客观性,精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5],这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比(Z%),和直线速度(VSL)的精子的百分比,与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的,而且没有显示临界值;高于临界值,妊娠率也不会进一步增加[7]。电脑全自动精子采集分析仪是一款高科技医疗设备,它巧妙地融合了现代计算机技术和自动控制技术。美国人精子分析WOB
HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,直线性(LIN):曲线轨迹的直线性。北京水生动物精子分析DCL
精液一般检查(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和**,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。(4)酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。北京水生动物精子分析DCL
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