美国HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOXIVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。精子分析可以分析参数有,曲线速率(VCL):精子头沿其实际曲线运动的时均速率。上海狗精子分析W.H.O 6
二、生化及免疫学检验:5、精浆肉碱测定【正常参考值】浓度为239.56±l05.59umol/L。【临床意义】精浆肉碱测定精浆中的肉碱主要由附睾分泌,其次是精囊。精浆中肉碱分为游离肉碱和乙酰肉碱二种,附睾中含高浓度的肉碱,主要与精子在附睾成熟时所需的能量来源有关。现认为精浆肉碱含量和果糖含量的变化,常反映附睾、精囊的功能。精浆肉碱及果糖含量正常,表明附睾、精囊功能正常。当肉碱含量高于正常的50%,而果糖含量降低,则提示精囊功能障碍,附睾功能正常;精浆肉碱约为正常含量的50%左右,果糖含量正常,说明附睾功能障碍,精囊功能正常;而肉碱急剧下降,果糖含量亦减少,表示精囊、附睾功能均发生障碍。6、抗精子抗体(AsAb)测定【正常参考值】阴性。【临床意义】AsAb检测对不育原因检查有重要临床意义。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活动,干扰精子的运行,阻碍精子穿透及精卵结合,使受精发生障碍。即使已经受精,也可能影响发育中的胚胎,造成免疫性流产。不育夫妇AsAb阳性者占25%-30%,当精子输出管道受阻、睾丸损伤、炎症、附睾等生殖系***时,系精子外逸而产生的自身抗体。香港密度精子分析VAPCASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。
精液显微镜检查精子计数:正常人精子计数为0.6×1012~1.5×0.012/L,相当于一次排出的精子总数为400×106~600×106。当精子计数值<20×106/ml或一次排精总数<100×106为精子减少,超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷,是导致少精或无精的重要原因,也是导致不育的重要原因。检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后,连续检查无精子,说明手术成功,如果结扎两个月后,精液中仍有精子,说明手术不成功。
医生为了鉴定男性生育能力,常嘱男方作精液检查,正常精液颜色为灰白色或乳白色。如节欲时间长者,可呈淡黄色,若出现鲜红色.暗红色,则提示患者有炎症或生殖道损伤。每次排精量为2~6毫升,常受排精次数与频率的影响。新鲜精液呈稠厚胶冻状,1小时之内应液化为稀薄的液体,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液丝长度一般不超过2厘米,否则视为异常。精液呈弱碱性,PH值为7.2~7.8。正常精子数应超过2000万/毫升。排精后1小时内活动精>=50%。世界卫生组织推荐精子活动力分为四级:0级:不活动;1级:精子原地摆动;2级:有中等的前向运动;3级:前向运动活跃,快速直线运动。正常的精子活动力为2~3级的精子>=40%~50%.精子形态:畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能单从精液的一项指标定论,应对精子数量活力活动率液化时间畸形率等多方面进行综合能力分析。采集精液前5~7天内必须停止性生活,并且不得有**、梦遗等情况,还应禁烟戒酒,忌服对生精功能有影响的药物等。精子分析仪的出现简化了检验流程,提高了诊断的可靠性,对于提升男性生殖健康领域的Z疗效果具有重要作用。
男科实验室中通常所指的质量包含三个方面:实验室内部质量、医生处置的质量以及结果的质量[3]。1.实验室内部质量与**分析有关的实验室内部质量主要是工作人员的素质和所采用仪器的质量。工作人员应经过特殊的培训仪器必须处于正常状态、确保准确的结果操作应符合规程[4]。CASA系统本身的质量难于评定。硬件如显微镜、影像摄影机和计算机经检查便可确定其可靠性。但软件并非如此软件中存在不确定的因素算法是软件中**重要的部分通常制造者保守这些秘密;因此有关软件的数学上、信息性的、统计学的或生物测量方面的检查实验室难于进行。不同品牌CASA分析的结果差异较大,因此,更高效精确的精液质量检测系统对促进男科学发展具有重要的意义。美国计数精子分析DCL
IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。上海狗精子分析W.H.O 6
[临床意义]1.若数日未**、且精液量少于1.5ml者为不正常,说明精囊或前列腺有病变;若精液量减至数滴,甚至排不出,称为无精液症,见于生殖系统的特异性***,如结核、淋病和非特异性炎症等。2.若精液量过多(一次超过8ml),则精子被稀释而相应减少,有碍生育。二、颜色检查[正常参考值]灰白或乳白色,久未**者可呈浅黄色。[临床意义]1.黄色或棕色脓样精液:见于精囊炎或前列腺炎等。2.鲜红或暗红色血性精液:见于生殖系统的炎症、结核和**等。三、粘稠度和液化检查[正常参考值]粘稠胶冻状,30分钟内自行液化。[临床意义]1.精液粘稠度低,似米汤样,可因精子量减少所致,见于生殖系统炎症。??2.液化时间过长或不液化,可抑制精子活动而影响生育,常见于前列腺炎症等。四、精子活动率检测[正常参考值]正常精子活力一般在Ⅲ级(活动较好,有中速运动,但波形运动的较多)以上,**后1小时内有Ⅲ级以上活动能力的精于应>0.60。[临床意义]如果0级(死精子,无活动能力,加温后仍不活动)和Ⅰ级(活动不良,精子原地旋转、摆动或抖动,运动迟缓)精子在0.40以上,常为男性不育症的重要原因之一。上海狗精子分析W.H.O 6
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