在脑卒中模型中用到的染色方法:•在脑卒中(如中风)的研究中,TTC染色同样用于区分正常的脑组织和缺血性损伤区域。正常的脑组织会被染成红色,而缺血区域则保持无色。•通过这种方法,研究人员可以直观地观察到脑组织中的缺血**和半影区,并进行定量分析。染色步骤1. 准备样品:•将动物安乐死后,迅速取出心脏或脑组织,并切成一定厚度的切片(通常为2mm厚)。2. 染色:•将切片放入预先配制好的TTC溶液中(通常是1%~2%的TTC溶解在生理盐水中)。•将切片置于37°C恒温水浴中孵育一段时间(通常为15-30分钟)。3. 固定:•染色完成后,将切片转移到4%多聚甲醛或其他固定液中进行固定,以防止组织自溶和保存染色结果。4. 拍照和分析:•固定后的切片可以用相机拍照记录,然后使用图像分析软件测量梗死区域和总组织面积,计算梗死面积占总组织面积的百分比。优点•操作简便:天狼星红染色在偏振光下可以区分不同类型的胶原纤维。江苏阿里辛蓝染色哪家好
TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)染色是一种常用的组织学染色方法,主要用于检测组织中的活性心肌细胞和脑组织的缺血性损伤。TTC染色在实验研究中特别有用,尤其是在评估心肌梗死和脑卒中模型中的缺血区域。TTC染色的基本原理TTC是一种无色的水溶性化合物,在活细胞中通过线粒体内的脱氢酶的作用被还原成红色的不溶性产物——甲臜(formazan)。这种红色产物只在有代谢活性的细胞中形成,而在坏死或缺血的细胞中则不会被还原,因此这些区域保持无色或白色。应用领域1. 心肌梗死模型:•在心肌梗死的研究中,TTC染色用于区分正常的心肌组织和梗死区域。正常的心肌组织会被染成红色,而梗死区域则呈现白色。•通过测量梗死区域与总心肌面积的比例,可以定量分析心肌梗死的程度。南京天狼星红染色 价格PAS染色用于检测糖原。
•病理染色流程之组织脱水:样品经过固定后,将通过一系列的酒精梯度逐步脱水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蜡中。这一系列步骤旨在去除组织中的水分,使其变得坚硬并易于切片。•石蜡包埋区:脱水后的组织被包裹在石蜡中,形成一个坚硬的块状物,便于后续的切片操作。•切片制作区:使用石蜡切片机(如Leica HistoCore MULTICUT)将包埋好的组织切成薄片(通常为4-5微米厚),以便于进一步的染色和观察。
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病理染色切片过程中值得注意的是1%伊红水溶液是理想的胞浆染液。要选择好水溶性的伊红染料使胞质鲜艳一些,切片不但漂亮且利于观片。(9)切片染色后的脱水要充分,每道乙醇脱水的时间不要过短,尤其是三道无水乙醇更为如此。无水乙醇要勤更换。(10)切片经***一次无水乙醇后尽快地放人二甲苯中。在夏季室内湿度较大的环境中更是如此。如切片在湿度大的空气中停留时间过长就会在封片时产生雾气,而不能现片。其原因是无水乙醇吸收了空气中的水汽,在二甲苯中难以分离析出,当用中性树胶封片后,二甲苯挥发,而水汽留在胶中产生雾气。(11)封片所使盖玻片需大小合适、清洁。树胶用量视盖玻片大小而定,要求不发生溢胶或缺如。(12)不提倡切片经无水乙醇,然后干燥,直接用中性树胶封固。这样会产生人为的细小黑点,与细胞核相似。(13)封片要在通风厨中进行,防止二甲苯污染工作间,危害技师的身体。病理染色是诊断模型是否造模成功的重要工具。
病理染色方法主要分为两种:石蜡切片法和冰冻切片法。1.石蜡切片法:•原理:石蜡切片法通过将组织样本固定在石蜡中,以保持其微细结构。固定后的组织被切成极薄的切片,然后进行染色处理。•优点:这种方法能够提供高质量的组织切片,适合长期保存和详细的显微镜观察。它可以显示组织和细胞的形态结构,并通过不同的染色技术揭示细胞内的化学成分。•应用:石蜡切片法广泛应用于病理学研究和临床诊断,特别是在**诊断中,通过观察组织切片中的病变细胞,病理学家可以做出准确的诊断。1.冰冻切片法:•原理:冰冻切片法是在低温条件下快速冷却组织样本,使其达到一定硬度,然后进行切片。这种方法能够较好地保存细胞膜表面和细胞内的酶活性以及抗原的免疫活性。•优点:冰冻切片法制作过程快捷简便,适合需要快速诊断的情况。它能够在短时间内提供病理信息,帮助外科医生在手术过程中做出及时的决策。•应用:这种方法常用于手术中的快速病理诊断,通过快速制作和染色切片,病理学家可以在手术过程中提供即时的病理评估,指导手术操作。苏丹黑B染色用于检测脂质和胆固醇。南京天狼星红染色 价格
免疫组织化学染色用于标记特定蛋白质。江苏阿里辛蓝染色哪家好
选择合适的染色方法取决于实验的具体目的和需要检测的组织或细胞成分。以下是一些常见的实验目的及其相应的染色方法:1.观察组织结构和细胞形态:•H&E染色(苏木精-伊红染色):适用于常规组织学和病理学检查,能够清晰区分细胞核和细胞质,显示组织结构和病变。2.检测结缔组织和纤维化:•Masson三色染色:用于区分肌肉、胶原纤维和细胞质,适合研究结缔组织和纤维化病变。3.检测糖原和多糖类物质:•PAS染色(过碘酸-Schiff反应):用于检测糖原、***和其他多糖类物质,常用于诊断糖原贮积病和******。江苏阿里辛蓝染色哪家好