使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
克罗诺杆菌筛选肉汤(CronobacterScreeningBroth,简称CSB培养基)是一种用于检测环境和食品中克罗诺杆菌的选择性培养基。克罗诺杆菌是一种重要的食源性的病原体,能够引起新生儿和婴儿的严重疾病,如坏死性小肠结肠炎、败血症和脑膜炎。以下是克罗诺杆菌筛选肉汤的一些特点和配制方法:1.**配方**:-蛋白胨:10.0g-牛肉浸粉:3.0g-氯化钠:5.0g-溴甲酚紫:0.004g-蔗糖:10.0g-万古霉素:0.01g-pH:7.4+/-0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取28gCSB培养基粉末,用1000ml去离子水重悬。-在121°C下灭菌15分钟。-冷却至大约50°C时,加入万古霉素(每100ml培养基中加入1mg万古霉素)。-混匀后分装到无菌容器中。3.**工作原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源。-氯化钠维持渗透压平衡。-蔗糖作为克罗诺杆菌可发酵的糖类。-溴甲酚紫作为pH指示剂,其变色范围为pH5.2(黄色)至pH6.8(紫色)。-发酵蔗糖产酸,使得培养基的pH下降,溴甲酚紫由紫色变为黄色。4.**用途**:-CSB培养基用于检测环境和食品中的克罗诺杆菌。LK培养基平板哥伦比亚肉汤能够支持包括细菌、酵母和霉菌在内的多种微生物的生长,尤其适合培养营养要求高的微生物。
溶菌酶营养肉汤基础是一种用于微生物学研究的培养基,特别是在鉴定某些细菌对溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:溶菌酶营养肉汤基础的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,这些成分为细菌的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子。此外,还需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一种能够水解细菌细胞壁的酶,主要用于检测细菌对溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,高压灭菌后冷却至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。5.**用途**:溶菌酶营养肉汤基础主要用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验,如GB4789.14-2014标准所述。它可以用来鉴定细菌是否能够在溶菌酶存在的情况下生长,从而帮助鉴别不同的细菌种类。6.**添加剂**:每瓶培养基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶营养肉汤中。
庆大霉素琼脂基础是一种用于微生物培养的培养基,其特点和应用如下:1.**用途**:主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养,符合GB标准。2.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉浸粉:3.0g/L-亚硫酸钠:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-蔗糖:10.0g/L-庆大霉素:250IU/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.3-8.7(25℃)3.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-蔗糖提供碳源;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-枸橼酸钠、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。4.**配制方法**:-称取本品56.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,加入无菌1%亚碲酸钾溶液0.5ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。-无需高压灭菌。5.**微生物质控结果**:-霍乱弧菌VBO:生长率PR≥0.7,淡灰色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922:选择性G≤3,无生长。庆大霉素琼脂基础因其特定的成分和用途,在食品卫生检验、医药、水质检测等领域有着广泛的应用。BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离,也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等。
葡萄糖肉汤培养基(DextroseBroth)是一种常用的微生物培养基,它主要含有蛋白胨、牛肉膏粉、氯化钠和葡萄糖等成分。这种培养基的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。**特点介绍**:1.**营养成分**:葡萄糖肉汤培养基含有的蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子,氯化钠维持渗透压,而葡萄糖则提供碳源。2.**应用范围**:它适用于营养要求高的细菌培养,特别是用于一次性使用卫生用品中溶血性链球菌的检测和肠杆菌科细菌的葡萄糖产气试验。3.**制备方法**:一般操作是称取一定量的培养基粉末,加入到一定量的蒸馏水或去离子水中,加热搅拌煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌。4.**质量控制**:通过使用特定的质控菌株进行测试,可以确保培养基支持目标菌株的生长。例如,乙型溶血性链球菌ATCC21059在该培养基中应表现出良好的生长,而大肠埃希氏菌ATCC25922则用于测试培养基的特异性。葡萄糖肉汤培养基因其营养均衡和制备简单,被用于微生物实验室进行细菌的分离、鉴定和培养研究。CVT琼脂培养基主要用于乳制品中嗜冷菌的计数,也可用于其他样品中嗜冷菌的分离和计数 。LK培养基平板
CAS培养基广泛应用于细菌铁载体的筛选试验,特别是在研究植物根际促生菌和微生物与植物相互作用的领域 。LK培养基平板
PALCAM琼脂基础是一种专门设计用于分离和培养单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。除了李斯特氏菌,它也可以用来分离其他类型的细菌,尽管其选择性成分主要针对李斯特氏菌。**特点**:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七叶苷、柠檬酸铁铵、葡萄糖、氯化锂、琼脂和酚红等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,特别是非李斯特氏菌的生长。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。尽管PALCAM琼脂基础主要用于李斯特氏菌的分离,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和肠球菌等,偶尔也能在该培养基上生长,利用甘露醇产酸使菌落和其周围的培养基呈黄色。