TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些主要特点和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化钠:5.0g/L-无水亚硫酸钠:3.0g/L-十二烷基硫酸钠:0.5g/L-猪胆粉:5.0g/L-利凡诺:0.03g/L-庆大霉素:500U/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-十二烷基硫酸钠、猪胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉培养基,加入1L蒸馏水或去离子水,加热煮沸充分溶解,冷却至50℃左右,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。4.**使用方法**:-从冷藏柜中取出平板皿,并恢复至室温。-将包装整体送入试验地点。-试验或接种。-将平板从洁净室取出,按规定的温度和时间倒置培养。-观察、计数。LB培养皿DCR培养基通常包含酵母浸膏、酪蛋白水解物、葡萄糖、无机盐等,这些为植物细胞提供碳源、氮源、维生素。
PALCAM琼脂基础是一种专门设计用于分离和培养单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。除了李斯特氏菌,它也可以用来分离其他类型的细菌,尽管其选择性成分主要针对李斯特氏菌。**特点**:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、玉米淀粉、酵母浸膏、甘露醇、七叶苷、柠檬酸铁铵、葡萄糖、氯化锂、琼脂和酚红等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,特别是非李斯特氏菌的生长。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。尽管PALCAM琼脂基础主要用于李斯特氏菌的分离,但某些非李斯特氏菌,如葡萄球菌和肠球菌等,偶尔也能在该培养基上生长,利用甘露醇产酸使菌落和其周围的培养基呈黄色。
DPD培养基(DPDMedium)是一种用于植物组织培养的培养基,其特点是全无机盐配方,适用于多种植物细胞的培养。以下是DPD培养基的一些关键特点:1.**成分**:DPD培养基包含多种无机盐和有机物,如硝酸铵、硫酸钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸二氢钾、硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)、硫酸锰、钼酸钠、硼酸、硫酸锌、硫酸铜、氯化钴、碘化钾、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、肌醇、叶酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激动素等。2.**pH值**:培养基的pH值调整至5.8,以满足植物细胞生长的需要。3.**用途**:DPD培养基主要用于植物组织的培养,包括植物细胞、组织的生长和发育。4.**配制方法**:通常称取一定量的DPD培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,分装后进行高压灭菌。5.**保存条件**:DPD培养基的保质期通常为三年,应避光、干燥保存,或根据需要保存于2-8°C。6.**注意事项**:在使用时,应检查培养基是否有颜色变化、蒸发/脱水情况或微生物生长。培养基融化后应立即使用,避免重复融化和长时间放置。7.**用法**:在使用前,需要调整pH值至5.8,并进行高压灭菌处理。DPD培养基因其成分稳定和适用性广,在植物组织培养领域有着广泛的应用。 BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离,也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等。
嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基(BacillusStearothermophilusRecoveryAgar)是一种专门用于灭菌与消毒鉴定试验的微生物培养基。以下是它的一些主要特点和用途:1.**配方成分**:该培养基的配方包括蛋白胨、牛肉膏粉、可溶性淀粉、葡萄糖和琼脂。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;可溶性淀粉和葡萄糖是可发酵的糖类,作为碳源;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值为7.1±0.2(25℃),为嗜热脂肪杆菌的生长提供了适宜的环境。3.**用途**:主要用于灭菌与消毒鉴定试验,通过观察嗜热脂肪杆菌在该培养基上的生长情况来判断灭菌和消毒的效果。4.**使用方法**:称取35g培养基粉末,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,然后在115℃下高压灭菌30分钟。5.**质量控制**:使用嗜热脂肪杆菌ATCC7953作为质控菌株,培养条件为56±1℃,24小时,生长率应达到PR≥0.7,表现为生长良好。6.**储存条件与保质期**:贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。7.**注意事项**:在称量时应注意防尘,佩戴口罩操作以避免呼吸道不适;使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块;质检报告可以登录相关网站下载。通常将卵磷脂吐温80营养琼脂培养基的粉成分溶解于蒸馏水中,加热煮沸以完全溶解,然后高压蒸汽灭菌15分钟。LB培养皿
TSFA含有胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、琼脂和脱脂奶粉等成分,为嗜冷菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。LB培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。