这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于细胞荧光示踪的原理能检测到单个的增殖细胞,但由于每增殖一次荧光减弱一半,在荧光显微镜下较难区分荧光减弱一半的细胞,检测灵敏度不是很高,通常*适用于流式细胞仪检测。在进行科学研究时,上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2-脱氧尿苷,是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine)类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。上海东寰向您介绍EdU细胞增殖检测试剂盒的好处。EdU细胞增殖检测试剂盒原理
与BrdU方法相比,EdU检测方法无需DNA变性,无需抗原修复,无需抗原抗体反应,更简单、更灵敏、更快速、更准确,是细胞增殖检测的比较好选择。更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;更简单--无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,反应单需要几分钟;更灵敏--无需抗体,检测染料单为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测;更快速--无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期单需2.5小时;更兼容--对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征。浙江EdU细胞增殖检测试剂盒价格EdU细胞增殖检测试剂盒运用再哪些领域?
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一种非常经典的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒,被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan(图1A)。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解(图1B)。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度(图2)。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒实测效果图。,在细胞培养箱内孵育4小时,显微镜下可见大量结晶状的深紫色产物formazan生成。B.不同数量HeLa细胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小时的效果图(上图)及深紫色产物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent),充分溶解后的效果图(下图)。
传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。EdU细胞增殖检测试剂盒的功能具体介绍。
EdU法中的点击反应原理图。掺入到细胞DNA中的EdU与荧光探针或生物素等标记的叠氮化物,在铜离子的催化下发生共价反应,形成稳定的三唑环,使细胞DNA标记上荧光探针或生物素。细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗药物效果等的基础实验手段。细胞增殖检测的方法按照原理通常可以分为五类:膜损伤检测、代谢活性检测、ATP水平测定、DNA合成检测和细胞荧光标记检测法。目前公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成EdU细胞增殖检测试剂盒,有哪些好处值得选择?浙江EdU细胞增殖检测试剂盒价格
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上海东寰生物科技有限公司即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法,但BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合,导致了DNA双链结构的破坏,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。EdU法作为新型的核苷渗入法具有以下优点:安全—–不使用[3H]thymidine,无放射性污染。简单—–基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,需三步:EdU孵育;细胞固定;荧光检测。无需DNA变性和孵育抗体。EdU细胞增殖检测试剂盒原理
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