EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,分子量很小,在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中,并渗入正在复制的DNA分子,通过基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间需几分钟,不需要DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。EdU细胞增殖检测试剂盒应用再哪些地方?湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用,请于4℃避光保存,有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板,HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞,以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中,培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU标记培养基;2、提前将2×EU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得1×EU溶液,其中EU的终浓度为500μM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时,弃培养基。河北提供EdU细胞增殖检测试剂盒购买EdU细胞增殖检测试剂盒厂家。
现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。
EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调:“与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo?荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA,简单,快速,准确。这种检测方法非常快速,且只需简单的几个步骤,因此也适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。
EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。本试剂盒可以检测到细胞或组织样品中单个的增殖细胞,同时也可以对细胞或组织样品总体的细胞增殖情况进行定量检测。本试剂盒可以检测培养的细胞或组织样品,也可以检测组织切片,但均需提前进行EdU的掺入。细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法有哪些领域需要使用EdU细胞增殖检测试剂盒?湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用?上海东寰告诉您。湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
EdU细胞增殖检测和BrdU细胞增殖检测的对比。小分子化合物AndyFluor™azide与EdU之间的点击化学(ClickChemistry)反应不需要DNA变性,就可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,该反应不受双链DNA中碱基对的影响,因此客户了BrdU掺入法的弊端。图2.使用EdU细胞增殖检测试剂盒对细胞和组织的染色效果。使用10μMEdU处理A549细胞2小时,然后分别使用AndyFluor™488azide(绿色,上图)、AndyFluor™594azide(红色,中间图)检测细胞增殖活性,使用DAPI进行复染(蓝色)。腹腔注射EdU到小鼠体内(每公斤小鼠注射5mgEdU),分别于0、12、24小时之后取小鼠肠组织,制成切片用AndyFluor™488azide(绿色,下图)检测细胞的增殖情况,使用DAPI进行复染(蓝色)。湖南品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商
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