EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针dU细胞增殖检测试剂盒找哪家比较安心?上海东寰不错。山东EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可直接并准确地检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒繁殖等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及各种药物的细胞增殖及活力筛选实验。山东EdU细胞增殖检测试剂盒说明书上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好?
使用本试剂盒所做结果可以用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行检测,也可以用于高内涵筛选(High-ContentScreening,HCS)。对6孔板培养的细胞(每孔500μl的Click反应液)、96孔板培养的细胞(每孔50μl的Click反应液)、每管细胞数量为10-100万的流式细胞仪检测(每管500μl的Click反应液)以及冰冻或石蜡切片的检测(每个样品100-200μl的Click反应液),不同规格的本产品可以提供的反应的量详见说明书中的表。光谱特性:488-Azide:绿色荧光,Ex/Em=491/518nm;Hoechst33342:蓝色荧光,Ex/Em=346/460nm,boundtoDNA。
羟基脲(Hydroxyurea)为DNA合成抑制剂,经过10mM羟基脲提0min处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,因此常被用作EdU实验的阴性对照。配制好的Click-iTAdditiveSolution请根据每次用量适当分装后-20℃保存,避免反复冻融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物质析出为正常现象,请上下颠倒几次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色,则说明有效成分降解,不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液,以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时,维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的EdU,请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用?上海东寰告诉您。
细胞增殖&细胞计数检测细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础,是生物体的重要生命特征。检测细胞在培养基或组织中的生长速率,对于细胞生长和分化研究至关重要。在药物开发过程中也常被用于评估药物的毒性和对细胞生长的抑制情况。细胞增殖检测通常是基于DNA含量或细胞代谢实现的,主要的研究方向为对活细胞的代谢活性的检测(基于WST、XTT、MTT等)及对DNA合成的检测(基于BrdU的免疫法或EdU的点击化学法),可通过体内成像、微孔板或流式细胞术检测等多种技术进行细胞示踪。使用四唑盐进行代谢活性检测通过添加四咪唑盐到细胞中可进行线粒体内酶代谢活性的测定。有哪些领域需要使用EdU细胞增殖检测试剂盒?山东EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
EdU细胞增殖检测试剂盒,有哪些好处值得选择?山东EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。山东EdU细胞增殖检测试剂盒说明书
EdU细胞增殖检测试剂盒稳定:适用于对细胞增殖状况的连续观察●经济:无需裂解细胞,细胞可继续培养或用...
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