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EdU细胞增殖检测试剂盒基本参数
  • 品牌
  • 东寰生物
  • 型号
  • C01503
  • 产地
  • 上海
  • 是否定制
EdU细胞增殖检测试剂盒企业商机

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可直接并准确地检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复、病毒繁殖等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及各种药物的细胞增殖及活力筛选实验。EdU细胞增殖检测试剂盒多少钱?品牌EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一种非常经典的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒,被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan(图1A)。在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解(图1B)。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度(图2)。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒实测效果图。,在细胞培养箱内孵育4小时,显微镜下可见大量结晶状的深紫色产物formazan生成。B.不同数量HeLa细胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小时的效果图(上图)及深紫色产物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent),充分溶解后的效果图(下图)。品牌EdU细胞增殖检测试剂盒供应商EdU细胞增殖检测试剂盒给社会带来了什么好处?

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细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU细胞增殖检测方法通过检测渗入DNA复制期间的EdU,借助荧光检测工具即可准确地检测出新增殖的细胞,快速统计处于S期的细胞百分数,分析细胞增殖情况。该方法简单、灵敏、快速、准确,适合各种细胞系的细胞增殖检测,尤其适用于高通量筛选试验,如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法,如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。EdU细胞增殖检测试剂盒的结构如何组成?

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通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。EdU细胞增殖检测试剂盒的重要组成部分。品牌EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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    摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ulTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;染色反应液组分500ul1ml2ml5mlIX反应缓冲液430ul860ulmlml催化剂溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA红色荧光溶液ulul5ulul缓冲添加剂50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟。(e)弃染色反应液,加入300ulTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;(f)弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色(a)将Hoechst33342用PBS溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗细胞两次,去掉洗液。品牌EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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