无锡外泌体提取试剂报价

外泌体的提取、分离方法：梯度密度离心法。研究发现，外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间，因此，可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合，原理是先除去非囊泡物质，再通过梯度密度浓缩提取外泌体，该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h，但是2012年，研究者[15]使用了62~90h才分离出某些确切囊泡，因此，该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足，污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层，特别是这个密度范围又比较宽。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯。无锡外泌体提取试剂报价

外泌体提取：1、过滤。超滤膜也可用于分离外泌体。根据外泌体的大小，从蛋白质和其他大分子中分离外泌体。较常见的过滤膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔径，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌体，也有设计成微柱多孔硅纤毛结构以分离40-100nm外泌体：不过，该方法由于过滤膜的粘附，可能会损失外泌体，并且过滤时的压力和剪切力，可能会使外泌体变形受损。2、基于聚合物的沉淀技术。基于聚合物的沉淀技术通常包括将样本与含聚合物的沉淀溶液混合，在4℃温育并低速离心。用于聚合物沉淀的较常见聚合物之一是聚乙二醇（PEG）。用这种聚合物沉淀具有许多优点，包括对分离的外泌体影响小、pH中性等。目前大多数快速分离外泌体的商品化试剂盒都是基于此方法。然而基于聚合物的沉淀方法可能会同时分离非囊泡污染物（包括脂蛋白）而且，聚合物材料的混杂可能会影响下游分析。无锡外泌体提取试剂报价磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点。

研究探讨了外泌体是否可以作为RNAi的有效载体的可能性。与脂质体和其他合成药物纳米颗粒载体不同，外泌体含有可能增强内吞作用的跨膜和膜锚定蛋白，从而促进其内容物的递送。CD47是外泌体蛋白质之一，是一个普遍表达的整合素相关跨膜蛋白，其部分功能可以保护细胞免受吞噬作用。CD47是信号调节蛋白α（SIRPα，也称为CD172a）的配体，CD47-SIRPα间的结合能够发出“不要吃我”的信号，从而压制吞噬作用。病基因RAS能够促进胰腺病细胞增殖，增强胞饮作用从而促进一些病症细胞摄取外泌体。合成纳米颗粒对细胞有一定毒性作用，但使用外泌体能够较小化对细胞的毒性。研究人员发现，CD47和病基因KRAS驱动的胞饮作用都会压制外泌体被循环系统的清理，并增强胰腺病细胞对外泌体的特异性。所以，外泌体的这种特性增强了它们通过递送RNAi来特异性靶向胰腺病中的KRAS的能力，并且使用外泌体作为单一靶向剂显着改善了所有实验PDAC小鼠模型的总生存期。

外泌体提取：尺寸排阻色谱。尺寸排阻色谱（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量实现分离大分子。该技术应用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根据其直径通过微球，半径小的分子需要更长的时间才能通过色谱柱的孔隙迁移，而大分子则从色谱柱中更早地洗脱。尺寸排阻色谱可以精确分离大小分子。此外，可以将不同的洗脱溶液应用于该方法。与离心方法相比，色谱分离已被证明具有更多优势，因为通过色谱分离的外泌体不受剪切力的影响，这可能会改变囊泡的结构。目前，SEC是一种普遍接受的分离血液和尿液中外泌体的技术。不过，该方法耗时较长，不适合大量样本处理。外泌体提取的方法：过滤。

外泌体的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）为常用的多聚物，可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀，早先应用于从血清等样本中收集病毒，现在也被用来沉淀外泌体，其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。利用PEG沉淀外泌体存在不少问题：比如纯度和回收率低，杂蛋白较多（假阳性），颗粒大小不均一，产生难以去除的聚合物，机械力或者吐温-20等化学添加物将会破坏外泌体等。外泌体提取：可以将不同的洗脱溶液应用于该方法。无锡外泌体提取试剂报价

用于外泌体提取的体液收集注意事项：抽血时间。无锡外泌体提取试剂报价

外泌体与肺病预后：外泌体mirRNA和蛋白质被认为是NSCLC的预后因子。Dejima等在研究NSCLC患者预后的生物标志物时发现，外泌体miR-4257和miR-21的含量显着上升。此外，还有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者较高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的复发率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血浆的外泌体时发现，NY-ESO-1是其中对低生存率有显着影响的标志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系统分析了28位NSCLC患者体内的365种miRNA，其中let-7f、miR-30e-3p和miR-20b表达均下调，进一步研究发现，let-7f和miR-30e-3p水平可以区分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p与不良预后密切相关。无锡外泌体提取试剂报价

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