数字PCR(DigtalPCR)是一种核酸定量精密检测的新兴技术手段,于20世纪由Vogelstein等提出。它是将稀释后的核酸模板分配到大量不同的反应单元中,使每个反应单元中有一个或没有核酸。利用PCR扩增的同时,加入可检测荧光。待扩增结束时,使用统计学方法采集每个反应单元出现的荧光次数,从而定量检测样本中的核酸浓度。基于分液方式的不同,数字PCR主要分为3种:微流体数字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴数字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片数字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,用户的信赖之选,有需要可以联系我司哦!北京样本数字PCR咨询报价
与常规的PCR的方法相比,dPCR有很好的优势。***定量常规PCR和实时荧光PCR定量检测都需要已知拷贝数的标准DNA制定标准曲线,由于样品测定在各种条件上不会完全一致,会造成PCR扩增效率的差异,从而影响定量结果的准确性。而ddPCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可以进行***定量。样品需求量低在检测珍贵样品和样品核酸存在降解时具有明显的优势。高灵敏度ddPCR本质上是 将一个传统的PCR反应分成了数万个 的PCR反应,在这些反应中可以精确地检测到很小的目的片段的差异、单拷贝甚至是低浓度混杂样品,且能避免非同源异质双链的形成。高耐受性由于目的序列被分配到多个微滴中,***降低了体系间的影响以及背景序列和***物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。北京样本数字PCR咨询报价浚和(上海)仪器科技有限公司为您提供数字PCR ,有想法的可以来电咨询!
精细诊断是精细医学的关键环节,液体活检作为一种无创、均一的检测技术,迅速成为精细诊断领域的新星,2015年被《麻省理工大学科技评论》评选为年度**突破技术,2017年入选世界经济论坛评出的全球**新兴技术,引发了全球科研、临床和产业界的极大热情,已在**、产前诊断、***移植等疾病领域***被应用。数字PCR技术与高通量的二代测序技术,共同组成液体活检领域的两大利器;数字PCR技术是公认的液体活检领域灵敏度比较高的检测方法,采用有限稀释的方法将目标分子分割到**的反应体系中,在不依赖标准曲线条件下实现靶标***定量检测,能检测低至0.01%的突变基因;Bio-Rad及ThermoFisher目前是这一领域的主导者,分别采用微滴或芯片方式将样本分割成两万份,MiniDrop™创新性采用高压驱动的方法将样本分割成50万份,打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断。
MicroDrop-100微滴式数字PCR应用范围如下:a.动植物检验检疫,动物源性分析、极微量病原菌检测定量分析、转基因产品检测;b.降低筛查成本、缩短检测周期,适用于T13\T18\T21三体综合征等遗传病的风险评估;适用于zhong瘤早期筛查、分子分型、靶向用药和疗效监测等;适用于传染性疾病的早期诊断和诊疗指导;c.可用于DNA甲基化的检测、CRISPR-Cas9基因编辑效率检测等。d.基因表达差异监测单细胞研究:测序、PCRe.无创产前筛查:低成本、快速、传染性疾病:HBV、HIV、COVID-19定量数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,让您满意,欢迎您的来电哦!
dPCR的基本原理目前dPCR主要有两种形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,就可以推算出原始溶液的核酸浓度。可以使用几种不同的方法来分配样品,包括微孔板,毛细管,油乳剂和带有核酸结合表面的小型化腔室阵列。样品的分配使人们可以通过假设分子种群遵循泊松分布来估计不同分子的数量,根据泊松分布的原理,反应体系中目标分子的拷贝数可以通过公式A=-ln[(N-X)/N]*N计算,从而解决了多个目标分子存在于单个液滴中的可能性。浚和(上海)仪器科技有限公司力于提供数字PCR ,有想法可以来我司咨询。北京样本数字PCR咨询报价
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MiniDrop数字PCR仪由Creator微滴生成仪、Detector微滴检测仪、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter数据分析软件组成,该系统的**为微流控微滴生成技术,采用原创性的油液,在40um微管道中利用气压驱动在2分钟内生成50万微滴,单次运行生成400万微滴,微滴体积达皮升级,检测线性范围达到5个数量级,各项指标均超越国内外的主流产品。MiniDrop创新性采用高压驱动的方法将样本分割成50万份,打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断。 北京样本数字PCR咨询报价
数字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近几年发展起来的一种核酸定量分析技术。相较于传统荧光定量PCR来说,数字PCR对结果的判定不依赖于扩增曲线循环Ct值,不受扩增效率的影响,能够直接读出DNA的分子个数,能够对起始样本核酸分子***定量。数字PCR基本原理是将一个样本分成几十到几万份,然后再将其分配到不同的反应单元中,使每个微滴单元包含一个或多个拷贝的核酸分子(即DNA模板),每个单元都会对目标分子进行扩增,然后再对每个单元进行荧光信号的统计并计算。相对而言,传统PCR或qPCR反应都是发生于同一体系当中,这也是数字PCR与其比较大的区别。 浚和(上海)仪器科技有限公司是一家专业...