Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型，在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度，降低了葡萄糖的用量，并修改了盐的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对***的细胞培养应用，我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂，用以持续监测培养液的酸碱度，在低PH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的PH值时使培养液呈紫色，PH值～，**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点，研究表明酚红可以模拟固醇类***（特别是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的细胞时（如乳腺组织），比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外，一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”，是体外培养中为预防微生物污染**常用的***，其中，青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，对革兰阳性菌特别有效；而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成，对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效，但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。 Ham’s F-12常作为无血清培养的基础培养液，在低血清含量下时，特别适合单细胞培养和克隆化培养。细胞培养基供应商
无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分，才能帮助细胞贴壁生长，包括以下几大类物质：1）促贴壁物质：一般为细胞外基质，如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子，对许多细胞的繁殖和分化，起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化，这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2）促生长因子：针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质，有些是许多细胞必不可少的，如胰岛素。3）酶抑制剂：培养贴壁生长的细胞，需要用胰酶消化传代，在无血清培养基中需含酶抑制剂，以终止酶的消化作用，达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4）结合蛋白和转运蛋白：常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大，可增加培养基的粘度，保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常见的。细胞培养基供应商Dulbecco’s 改良培养基与MEM培养基相比，氨基酸的含量增加了2倍，维生素的含量增加了4倍。
Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型，在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度，降低了葡萄糖的用量，并修改了盐的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对***的细胞培养应用，我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。葡萄糖可以根据研究需要，随意调节葡萄糖的浓度，方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂，对细胞无毒性作用，添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围，可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。
Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型，在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度，降低了葡萄糖的用量，并修改了盐的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对较广的细胞培养应用，我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。NEAA（非必须氨基酸），是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（门）冬酰胺、L-天（门）冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA，能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用，有效促进细胞增殖代谢。 Dulbecco’s 改良培养基–DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）现已广应用于各种细胞的培养。
1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物。Ham’s F-12营养混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）是由Ham以Ham’s F-10营养混合物为基础设计而成的。细胞培养基供应商
McCoy’s5A培养基是改良的Basal Medium5A，McCoy’s 5A含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖。细胞培养基供应商
Leibovitz’sL-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成，代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统，同时，用半乳糖和**酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成，有助于维持培养液PH的稳定，适合用于非CO2平衡环境的细胞培养。Leibovitz’sL-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代（如胚胎和成人组织）细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等。NEAA（非必须氨基酸），是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（门）冬酰胺、L-天（门）冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA，能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用，有效促进细胞增殖代谢。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂，用以持续监测培养液的酸碱度，在低PH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的PH值时使培养液呈紫色，PH值～，适合细胞培养。但酚红也有一些缺点，研究表明酚红可以模拟固醇类（特别是雌）的作用，因此在用到雌敏感的细胞时（如乳腺组织），较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外，一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。 细胞培养基供应商
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