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免疫组化基本参数
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免疫组化企业商机

什么是免疫组化?免疫组化的原理是什么?

1、定义:用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。

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2、原理:根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 英瀚斯生物实验外包,多种病理染色熟练掌握,可做免疫组化!安徽病理免疫组化外包

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免疫组化临床应用对“未分化”cancer的分类。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer细胞的起源特征不能分类,初步区分组织学类型用非特异性抗体,在其基础上再选用特异性抗体做进一步鉴定。如分化差的cancer可显示Vimentin或S-100蛋白,有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原,一些黑色素瘤表现出角蛋白,这同时也强调了在cancer诊断中应使用一组抗体而不是单个抗体。如果您有实验外包的需求,可以与我们南京英瀚斯生物进行联系,我们也有做免疫组化的服务!内蒙古病理免疫组化做免疫组化意味什么?

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免疫组化技术有哪些应用?

定位和定性是免疫组化比较大的优势。相比于其他蛋白检测方法,免疫组化具有定位较直接准确、定性灵敏度高,是定位检测分析优先方法,尤其对于有些因子的转位研究十分有用。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:恶性**的诊断与鉴别定性;确定转移性恶性**的原发部位;对某类**进行进一步的病理分型;软组织**诊断;为临床提供治疗方案的选择;近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难**得到了明确诊断。免疫组化在**诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化**的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。


免疫组化的局限性,可能会有假阳性。阳性信号定位不正确即为假阳性,包括着色不匀、背景着色、边缘效应,另外组织的某些特定成分也能导致假阳性结果。假阳性可能的原因有:(1)一抗浓度及一抗是否失效,抗体有一个合适的浓度范围且必须在有效期内使用,过期的抗体或者不着色,或者背景着色,形成假阳性;(2)试剂未充分覆盖组织,组织边缘的试剂易干浓度较组织中间高致深染;(3)抗体孵育时间过长,由于室温的影响夏季孵育时间稍短,冬季孵育时间稍长;(4)操作过程中组织变干,造成组织边缘收缩或损坏形成伪影,产生假阳性;(5)3,3'-二氨基联苯胺(DAB)显色时间太长,DAB宜现配现用,配制时间比较好在30min以内;(6)由于胞浆里含有较多的蛋白质,因此间质和胞浆中出现很多非特异性的染色,如内源性酶血红蛋白、肌红蛋白等造成的着色,可以通过血清封闭解决;乳腺cancer组织中的脂肪细胞、淋巴细胞也会产生非特异性的染色;(7)非特异性抗体吸附常见于坏死组织中,使坏死组织呈较高的背景染色,在免疫组化中应避免选择坏死组织较多的蜡块。免疫组化结果分析是什么?

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免疫组化的优缺点

免疫组化的优点在于其高特异性和敏感性,能够在组织原位检测目标蛋白的表达和分布。此外,免疫组化可以与其他技术(如荧光显微镜、电子显微镜)结合,提供更丰富的信息。然而,免疫组化也存在一些缺点。首先,实验步骤复杂,需要优化多个参数(如一抗浓度、孵育时间)。其次,免疫组化的结果可能受到组织固定、抗原修复等因素的影响,导致假阳性或假阴性结果。此外,免疫组化的定量分析相对困难,通常只能进行半定量分析。 在南京英瀚斯做的免疫组化,效果不错!辽宁靠谱免疫组化检测

如何做好免疫组化实验?安徽病理免疫组化外包

免疫组化应该选择石蜡切片还是冰冻切片? 

(1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是***我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。

(2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写着两者都可,那就都能做。

(3)石蜡切片的优点可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,而冰冻切片比较麻烦,一定要存在-80度的低温冰箱中,尤其是用来做原位杂交的的切片,为了防止RNA降解,保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到4微米左右,所以原位杂交探针容易渗透到组织中去,容易成功,而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。

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