HE染色实验步骤：（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。（6）吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可专业的HE染色服务平台，南京英瀚斯生物。云南比较好的HE染色价格
HE染色细胞浆染色原理：细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。什么是HE染色外包比较基础的病理染色HE染色。
HE染色细胞质过染分析及应对原因：（1）伊红染色液浓度太高，特别是焰红燃料、四溴四氯荧光素钠的存在；（2）切片在伊红染色时间过长；（3）切片在伊红染色后经乙醇脱水步骤时过的太快，而使乙醇分化伊红的作用不能产生。对策：适当稀释伊红染色液，减少伊红染色时间，或者使切片在乙醇脱水等步骤时，停留时间相对均匀。同样，也要检查切片的厚度是否合适。切片中出现蓝黑色沉淀物分析及应对原因：苏木精染色液中的金属膜，黏附在玻片上。对策：每天染色前仔细过滤苏木精染色液，或建议使用半氧化苏木精染色液，如Gill苏木精染色液,可以避免过多的金属膜产生。
HE染色常见问题：切片染色不均匀，有片状的弱着**存在答：（1）取材时组织太厚，固定过久，导致深部组织固定不佳，而表浅组织过度固定，而透明、脱水、浸蜡均是如此，这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。（2）制片过程有问题，切片厚薄不一，或者有刀痕，或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一，一般都是在制片时，刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳（一般比较好角度为5°）（3）脱蜡前未烘烤，脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久，导致脱蜡不彻底。（4）染色液过少，着色不均匀；或染色时部分组织干涸而另一部分湿润，这样会导致组织吸附染料的能力不一。（5）分化不当。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。HE染色观察细胞形态变化。
HE染色不管怎么操作，始终无法染色或淡染答：这种情况一般因为组织固定时采用了酸性甲醛;或者组织在甲醛中浸泡时间太长;或者久置的甲醛变性分解为甲酸。补救：防患于未然，要么使用新鲜的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一点碳酸钠中和甲酸。对于已经固定的组织可考虑再次固定；对于已经制出的片子，染色前采用5%重铬酸钾溶液浸泡半小时以上，然后自来水漂洗5min，可改善染色。也可以将切片放入3%硫酸铁铵溶液中，补充染色媒介，增强苏木素与组织的亲和力(苏木素染色必须要媒介才能染上，单纯的苏木素与组织的亲和力很弱)。肾脏组织HE染色如何观察。山东比较好的HE染色哪家好
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HE染色常见问题：成片的染色模糊不清，灰染答：（1）组织未及时固定，部分自溶；或固定不佳，深部组织未处理到。这种只能重新固定了。（2）尽管乙醇也是一种固定液，但尽量少用或不用，因为其会导致组织发硬变脆，染色效果不好。（3）包埋时蜡的温度过高，或切片后烤片时间和温度过久过高都不好，可能会导致无法染色。（4）脱蜡不彻底；染料有问题；分化过度导致的颜色变淡，镜下组织界限不清；染完后的脱水和透明不佳，水雾残留在组织上。（5）通风窗中（防止空气中的水雾），戴口罩操作封片（减少哈气带来的水雾）。云南比较好的HE染色价格
